犬猫血液输血知识资料.doc

动物交叉配血试验一、概述交叉配血试验用于检测贫血的受血者和供血者之间的血清型是否相容, 用于预防受血动物输血后发生输血反应。 1. 主测配血试验是检测受血者血清中是否有抗供血犬红细胞抗体,如果有则不能输血。主测配血试验:受血者血浆+ 供血者红细胞 2. 副测配血试验是检验供血者血清中是否有抗受血犬红细胞抗体,即使有也可以忽略,因为供血犬血液进入受血犬体内后很快被稀释。副测配血试验:供血者血浆+ 受血者红细胞 3. 多数犬不存在自然产生的抗体,因此从未输过血的犬初次交叉配血试验显示相容性。 4. 曾经有受血经历的犬, 在第二次输血前, 即使用同一供血犬, 也一定要做交叉配血试验。 5. 猫能产生自然同种抗体,所以在猫输血前必须做交叉配血试验。交叉配血试验还能鉴定猫的血型,若主测配血试验不相合,受血猫可能为 B 血型,供血猫为 A 型血。若副测配血试验不相合,受血猫可能为 A 血型,供血猫为 B 血型。如果交叉配血实验相合,则供血猫和受血猫血型相同。猫的血液最好在需要输血时,现采血现输血,不要长期贮存。二、步骤 1) 分别取 毫升受血者和供血者的抗凝血液,可用 EDTA 抗凝,或者从供血袋内取血; (见下图) 2) 对抗凝血进行离心, 2000 转每分钟,离心 5 分钟;( 见下图) 3) 离心后,用移液枪吸取上面血浆,放入另外的一个试管,并标记;或者直接转移入贴有主测、副测和受血者对照标签的 3支1 毫升离心管中,每支离心管中加对应血浆 100 微升。(见下图) 4) 用磷酸盐缓冲盐水或者生理盐水洗涤红细胞 3 遍,并制成 5% 的红细胞悬液。操作方法是:加入洗涤液后,用手指轻弹试管底,使红细胞和洗涤液混合,再 2000 转每分钟离心 5 分钟,取上清液扔掉,如此重复 3 次;(见下图) 5) 向装有 100 微升血浆的离心管中各加入 100 微升对应的 5% 红细胞悬液,并在室温下静置 15 分钟;(见下图) 主测配血试验: 100 微升受血者血浆+100 微升 5% 供血者红细胞悬液,轻轻混合副测配血试验: 100 微升供血者血浆+100 微升 5% 受血者红细胞悬液,轻轻混合对照试验: 100 微升受血者血浆+100 微升 5% 受血者红细胞悬液,轻轻混合 6) 离心后,检查上清液有无溶血;(见下图) 7) 轻轻晃动离心管,肉眼或借助显微镜观察有无凝集;(见下图) 8) 主测配血试验出现任何程度的溶血或凝集都表示血型不合, 副测配血试验出现轻微溶血或凝集可用于紧急情况下的输血,但是必须仔细监护; 9) 当受血者对照试验出现凝集或溶血后,不应进行交叉配血。三、结果判读相容现象( 400X 镜) 凝集现象:可见红细胞凝集,凝块大小可能会有差异。(见下图, 100 倍镜、 400 倍镜) 交叉配血试验无凝集时才可以输血。四、备注要使用磷酸盐缓冲盐水或者生理盐水洗涤红细胞,输血时最好用生理盐水稀释。因为 5% 的葡萄糖对红细胞能造成伤害(见下图)。蒸馏水对红细胞也能造成伤害。犬猫交叉配血方法( 康乐佳宠物医院玲玲) 交叉配血实验( corss-match test )是同种异体肾移植手术前必须做的检测。广泛应用于临床输血前检查。将供血者的红细胞与受血者的血清进行血清配合试验, 称为主侧试验( major crossmatch );把受血者的红细胞与供血者的血清作配合试验,称为次侧试验( minor crossmatch )。这样既可检验血型是否适合,又能发现他们的红细胞或血清中是否还存在一些其它的凝集原或凝集素, 是否可引起红细胞凝集反应。减少显微血管吻合后出现血栓的可能。交叉配血试验, 在 37℃下进行,以保证可能有的凝集反应得以充分显示。具体步骤如下: a. 分别从供体和受体采血 1ml ,用 EDTA 抗凝。 b .在离心机内离心 1min ( 1000rpm )。吸出血清至另一标记好的试管内 c. 受体和供体的红细胞分别配制成 2% 红细胞混悬液: 抽取 红细胞至另一试管内,并加入 %NaCl 生理盐水 5ml 。充分混匀 d .清洗红细胞:将上述混悬液离心 1min ( 1000rpm ),用吸管吸除红细胞上方的生理盐水,然后再加入 %NaCl 生理盐水 5ml ,混匀后再重复上述操作。至少清洗红细胞 3遍。最后配制成清洗后的 2 %红细胞混悬液。 e .主侧试验:吸取受体的 2 滴血清和供体的 2滴2 %红细胞混悬液至一试管内混匀。次侧试验: 吸取供体的 2 滴血清和受体的 2滴2 %红细胞混悬液至另一试管内混匀。为了便于对照, 分别将自体的2 滴血清和自体的2滴2 %红细胞混悬液至一试管内混匀。置于 37° 温箱内温浴 30min 。 f .检查试管内红细胞是否出现凝集反应、是否溶血。