细胞通透性实验报告.docx

山东大学实验报告2019年3月14日姓名系年级17级学号同组者科目细胞实验实验题目观察细胞的通透性仪器编号一、;;二、实验原理细胞膜是一种半透膜,对物质的通透具有选择性,使细胞具有一个相对稳定的内环境。将红细胞放在低渗溶液中,水分子会大量渗到细胞内,使细胞胀破,血红蛋白释放到介质中,发生溶血。将红细胞放入含有不同溶质的溶液中,由于细胞膜对各种溶质的透性不同,有的溶质可以渗入,有的则不能,渗入的溶质能提高红细胞的渗透压,所以促使水分进入细胞。由不透明的红细胞悬液变为红色透明的血红蛋白溶液,这种现象称为溶血(hemolysis)。随着水分不断进入,红细胞最终破裂并引起溶血。因而发生溶血现象所需的时间长短可以作为测量物质进入红细胞速度的一种指标。因此,本实验选用红细胞作为细胞膜透性的实验材料,将其放人不同的介质溶液中,观察红细胞的变化。三、(事先取好,加入Alsever液,混匀后制悬液,4℃保存);%的氯化钠溶液(等渗溶液);%的氯化钠溶液(低渗溶液)、、6%的葡萄糖溶液、2%的TritonX-100溶液(高渗溶液);(此处用的是刻度离心管)六支、离心机、滴管、载玻片、盖玻片、显微镜等四、,%的氯化钠溶液,混匀后放入离心机,1200rpm离心5min;,加入与沉淀量相等的等渗NaCl溶液,混匀制成悬液。(,则补充鸡血)%的氯化钠溶液、%的氯化钠溶液、、、6%的葡萄糖溶液、2%的TritonX-100溶液3mL,滴入两滴细胞悬液,立即混匀并计时,溶血现象发生后,记录溶血时间,并制片观察溶血情况:%的氯化钠溶液、、2%的TritonX-100溶液(高渗溶液)反应非常迅速,因此需立即观察;、6%的葡萄糖溶液反应程度不剧烈,所以,每间隔10分钟观察记录溶血情况,观察1h。注意:6%的葡萄糖溶液有强烈的诱导细胞融合的作用,因此,必须严格混匀之后进行观察。五、实验结果判断(一)判断指标(1)不溶血:液体分二层,上层浅黄色透明,下层红色不透明。镜检红细胞完好。(2)不完全溶血:溶液混浊,上层变成红色,镜检有部分红细胞有缺口或破裂。(3)完全溶血:液体变红而且透明,镜检发现细胞全部成碎片。(二)记录溶血时间:%NaCl+稀释鸡血否等渗溶液中不会发生破裂,作为对照。%NaCl+稀释鸡血是30s低渗溶液,细胞吸水涨破。+稀释鸡血是8s高渗溶液,细胞通透性大,导致胞内渗透压升高,吸水涨破。+稀释鸡血是9s高渗溶液,细胞通透性大,导致胞内渗透压升高,吸水涨破。山东大学实验报告2019年3月14日姓名系年级17级学号同组者科目细胞实验实验题目观察细胞的通透性仪器编号6%葡萄糖溶液+稀释鸡血是1h内未完高渗溶液,细胞吸收缓慢,细全溶血胞逐渐吸水涨破。是1h内未完2%TritonX-100溶液+稀释鸡高渗溶液,细胞吸收缓慢,细血全溶血胞逐渐吸水涨破。六、%NaCl溶液(对照组)%NaCl溶液下的细胞形态(放大倍数10×40):细胞轮廓明显清晰,细胞大小正常,细胞质透光正常。%NaCl溶液图2加入后30s,细胞悬液出现溶血现象:%NaCl溶液后的细胞形(右为等渗对照,左为实验组)由深红色态(10×40):溶血后,细胞破裂,留下溶液变为,透明、颜色较浅的溶液。一个模糊的血影(较暗视野观察)。,:象:(10×40):溶血之后,仍是细胞破裂,(右为等渗对照,左为实验组)由深红留下模糊的血影(在较暗视野下观察)。色溶液变为透明、颜色较浅的溶液。-100溶液图6加入后9s,细胞悬液发生溶血现图7加入TritonX-100后细胞的状态象:(10×40):溶血后,细胞膜遭到破坏,(右为等渗对照,左为实验组)由深红