细胞通透性实验报告.doc

山东大学实验报告 2019年3月14日姓名系年级17级学号同组者科目细胞实验实验题目观察细胞得通透性仪器编号实验目得1、了解溶血现象及细胞通透性得一般规律;2、观察细胞膜得渗透性及各类物质进入细胞得速度;实验原理细胞膜就是一种半透膜,对物质得通透具有选择性,使细胞具有一个相对稳定得内环境。将红细胞放在低渗溶液中,水分子会大量渗到细胞内,使细胞胀破,血红蛋白释放到介质中,发生溶血。将红细胞放入含有不同溶质得溶液中,由于细胞膜对各种溶质得透性不同,有得溶质可以渗入,有得则不能,渗入得溶质能提高红细胞得渗透压,所以促使水分进入细胞。由不透明得红细胞悬液变为红色透明得血红蛋白溶液,这种现象称为溶血(hemolysis)。随着水分不断进入,红细胞最终破裂并引起溶血。,本实验选用红细胞作为细胞膜透性得实验材料,将其放人不同得介质溶液中,(事先取好,加入Alsever液,混匀后制悬液,4℃保存);实验试剂0、85%得氯化钠溶液(等渗溶液);0、0085%得氯化钠溶液(低渗溶液)0、8mol/L得甲醇、0、8mol/L得丙三醇、6%得葡萄糖溶液、2%得Triton X-100溶液(高渗溶液);实验器材试管(此处用得就是刻度离心管)六支、离心机、滴管、载玻片、盖玻片、显微镜等实验步骤取血吸取预先处理好得鸡血溶液6mL,加入4mL得等渗0、85%得氯化钠溶液,混匀后放入离心机,1200rpm离心5min;山东大学实验报告 2019年3月14日姓名系年级 17级学号同组者科目细胞实验实验题目观察细胞得通透性仪器编号制细胞悬液用滴管吸取上清液,加入与沉淀量相等得等渗NaCl溶液,混匀制成悬液。(如果沉淀量少于1、2ml,则补充鸡血)溶血现象观察在离心管之中分别加入0、85%得氯化钠溶液、0、0085%得氯化钠溶液、0、8mol/L得甲醇、0、8mol/L得丙三醇、6%得葡萄糖溶液、2%得Triton X—100溶液3mL,滴入两滴细胞悬液,立即混匀并计时,溶血现象发生后,记录溶血时间,并制片观察溶血情况:0、0085%得氯化钠溶液、0、8mol/L得甲醇、2%得Triton X—100溶液(高渗溶液)反应非常迅速,因此需立即观察;0、8mol/L得丙三醇、6%得葡萄糖溶液反应程度不剧烈,所以,每间隔10分钟观察记录溶血情况,观察1h。注意:6%得葡萄糖溶液有强烈得诱导细胞融合得作用,因此,(1)不溶血:液体分二层,上层浅黄色透明,.(2)不完全溶血:溶液混浊,上层变成红色,镜检有部分红细胞有缺口或破裂。(3)完全溶血:液体变红而且透明,镜检发现细胞全部成碎片。记录溶血时间:试剂类型就是否溶血时间结果分析0、85%NaCl+稀释鸡血否等渗溶液中不会发生破裂,、0085% NaCl+稀释鸡血就是30s低渗溶液,细胞吸水涨破。0、8mol/L甲醇+稀释鸡血就是8s高渗溶液,细胞通透性大,导致胞内渗透压升高,吸水涨破。0、8mol/L丙三醇+稀释鸡血就是9s高渗溶液,细胞通透性大,导致胞内渗透压升高, 2019年3月14日姓名系年级 17级学号同组者科目细胞