公共卫生微生物采样检测方法总结.docx

【】 水中微生物检测方法
　　一、空气中微生物的检测方法------细菌总数
　　
　　撞击法
　　自然沉降法
　　采样：梅花布点，高度：~；离墙：1m。
　　二、茶具微生物检验方法
　　细菌总数
　　1、生理盐水的制法：将氯化钠溶解于蒸馏水中，分装到试管内，每管10mL，121℃高压灭菌20min。
　　2、采样：棉拭子湿润生理盐水，在茶具内、外缘涂抹50cm2，即口唇接触处一圈，用灭菌剪刀剪去棉签手接触处，将棉拭子放入10mL生理盐水中，4h内送检。
　　3、检验程序：
　　检样→各1mL加入两块灭菌平皿→37℃，48h培养→菌落计数→报告
　　4、单位：cfu/cm2。
　　大肠菌群
　　1、培养基：乳糖胆盐发酵培养液
　　2、检测方法：发酵法
　　3、检样
　　4、革兰氏染色过程：
　　初染：1min，水洗；
　　碘染：1min，水洗；
　　脱色：30s，水洗；
　　复染：1min，水洗，待干，镜检。
　　5、结果报告：凡乳糖发酵管最终产酸产气，革兰氏染色为阴性的无芽孢杆菌，即可报告检出大肠菌群。
　　三、毛巾、床上卧具微生物检测方法
　　细菌总数
　　
　　毛巾、枕巾：对折后两面的中央各25cm2；
　　床单、被单：在上下两部中央25cm2来回涂抹；
　　2、检测程序同茶具细菌总数检测
　　：cfu/25cm2。
　　大肠菌群
　　：
　　四、理发用具微生物检验方法
　　大肠菌群
　　1、采样
　　推子：在推子前部上下部分均匀各涂抹三次；
　　理发刀、剪和修脚工具：在使用的刀、剪面的两侧各涂抹一次采样；两个刀或者两个剪为一份样品。
　　2、检样5mL倒入双料乳糖胆盐发酵管，37℃，24h培养；
　　3、分离培养：接种伊红美蓝平板，做革兰氏染色镜检；
　　4、证实试验：接种乳糖发酵管37℃，24h培养，观察产气情况。
　　5、结果报告：乳糖管最终产酸产气、革兰氏染色为阴性的无芽孢杆菌，可报告为大肠菌群阳性。
　　金黄色葡萄球菌
　　1、培养基：%的氯化钠肉汤或胰酪胨大豆肉汤培养基
　　2、步骤：
　　做大肠菌群剩余的5mL倒入培养基中，37℃，24h培养；
　　接种血平板，37℃，24h培养；观察形状：圆形、金黄色、凸起、表面光滑、周围有溶血圈；
　　挑菌落做镜检：革兰氏阳性，葡萄状排列；
　　甘露醇发酵试验：接种到甘露醇发酵培养基中，37℃，24h培养，观察是否产酸；
　　血浆凝固酶试验
　　玻片法：在干净的玻片两边，一端滴一滴生理盐水，一端滴一滴血浆，接种环挑菌落分别与它们混合。5min后均无凝固现象的为阴性；若血浆中出现颗粒状凝块而生理盐水中没有，则为阳性。
　　五、拖鞋微生物检验方法
　　霉菌与酵母菌
　　：霉菌培养基、孟加拉红培养基、马铃薯葡萄糖琼脂培养基
　　：有棉拭子在每只拖鞋鞋面与脚趾接触处的5cm×5cm面积上均匀涂抹3次，一双拖鞋为一份样品；
　　，使霉菌孢子分开；
　　：在霉菌培养箱中25~28℃，培养观察一周。