公共卫生微生物采样、检测方法总结.doc

NurfürdenpersönlichenfürStudien,Forschung,ürdenpersönlichenfürStudien,Forschung,zukommerziellenZweckenverwendetwerden空气中微生物的检测方法------细菌总数(营养琼脂,121℃高压灭菌20min,培养时间37℃,48h)两种方法撞击法(二级或者六级微生物采样器)自然沉降法(暴露5min)采样:梅花布点,高度:~;离墙:1m。茶具微生物检验方法(一)细菌总数1、生理盐水的制法:将氯化钠()溶解于蒸馏水(1000mL)中,分装到试管内,每管10mL,121℃高压灭菌20min。2、采样:棉拭子湿润生理盐水,在茶具内、外缘涂抹50cm2,即口唇接触处一圈(1~),用灭菌剪刀剪去棉签手接触处,将棉拭子放入10mL生理盐水中,4h内送检。3、检验程序:检样→各1mL加入两块灭菌平皿(若污染严重,可十倍递增稀释)→37℃,48h培养→菌落计数→报告单位:cfu/cm2。大肠菌群培养基:乳糖胆盐发酵培养液(双料的,每管10mL,115℃高压灭菌15min)检测方法:发酵法(具体内容课本11页)检样(测定细菌总数余下的样品)革兰氏染色过程:(阳性菌显紫色,阴性菌显红色)初染:1min,水洗;碘染:1min,水洗;脱色:30s,水洗;复染:1min,水洗,待干,镜检。结果报告:凡乳糖发酵管最终产酸产气,革兰氏染色为阴性的无芽孢杆菌,即可报告检出大肠菌群。三、毛巾、床上卧具微生物检测方法(一)(1)毛巾、枕巾:对折后两面的中央各25cm2;(2)床单、被单:在上下两部中央25cm2来回涂抹;2、:cfu/25cm2。(二)大肠菌群(检测程序同茶具大肠菌群检测):(用测定细菌总数时采集的样品)四、理发用具微生物检验方法(一)大肠菌群1、采样推子:在推子前部上下部分均匀各涂抹三次;理发刀、剪和修脚工具:在使用的刀、剪面的两侧各涂抹一次采样;两个刀或者两个剪为一份样品。检样5mL倒入双料乳糖胆盐发酵管,37℃,24h培养;分离培养:接种伊红美蓝平板,做革兰氏染色镜检;证实试验:接种乳糖发酵管37℃,24h培养,观察产气情况。结果报告:乳糖管最终产酸产气、革兰氏染色为阴性的无芽孢杆菌,可报告为大肠菌群阳性。金黄色葡萄球菌培养基:%的氯化钠肉汤或胰酪胨大豆肉汤培养基步骤:做大肠菌群剩余的5mL倒入培养基中,37℃,24h培养;接种血平板,37℃,24h培养;观察形状:圆形、金黄色、凸起、表面光滑、周围有溶血圈;挑菌落做镜检:革兰氏阳性(红色),葡萄状排列;甘露醇发酵试验:接种到甘露醇发酵培养基中,37℃,24h培养,观察是否产酸;血浆凝固酶试验玻片法:在干净的玻片两边,一端滴一滴生理盐水,一端滴一滴血浆,接种环挑菌落分别与它们混合。5min后均无凝固现象的为阴性;若血浆中出现颗粒状凝块而生理盐水中没有,则为阳性。拖鞋微生物检验方法霉菌与酵母菌(生理盐水中要加入玻璃珠)培养基:霉菌培养基、(虎红)孟加拉红培养基、马铃薯葡萄糖琼脂培养基(PDA)取样:有棉拭子在每只拖鞋鞋面与脚趾接触