垂体腺瘤的蛋白质组学的l研究.pdf

後旦大学垂体腺瘤的蛋白质组学研究硕士学位论文业:外科学指导教师:鲍伟民教授导师组成员:杨伯捷副教授完成日期:谢嵘主治医师刘杭助理研究员院专姓系:名:华山医院王孟钧年
第一部分垂体腺瘤组织的差异蛋白质组学材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯第二部分应用串联狾全文结论与展望⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯文献综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯●中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯小结⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯
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第二部分应用—串联狾技术对正常垂体组织蛋白表达谱的研究目的建立正常人垂体组织蛋白表达谱。方法应用最新的二维高效液相色谱瓾串联多级线性离子阱和静电场轨道阱电喷雾电离质谱—际醴治稣4固遄橹⒂媚袂狗际踅械鞍锥浚⒄4固宓娜ǖ鞍字时泶锲资菘狻结果首次建立了含龅愕恼4固遄橹亩康娜ǖ鞍字适菘猓⒍云浣了分类。与结合、黏合作用有关的蛋白所占的比例最高,其次是有催化活性的蛋紅,其中含量较高的重要蛋白质有徒涸鞍住⒋呷樗亍⑸ぜに亍⑽⒐艿白等。结论运用最新的蛋白质组学技术可高效、准确、全面的建立垂体组织的全蛋白表达谱,它填补了蛋白质组学在垂体方面的研究空白,也为进一步研究垂体瘤的发病机制奠定基础。关键词正常垂体组织,珽,际中图分类号,,●◆中文摘要
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前言一、概况二、基础研究现状垂体激素的分泌水平。掣垦芯糠⑾諴腺瘤及无功能腺瘤中垂体腺瘤简称垂体瘤,是一种常见的颅内内分泌肿瘤,约占颅内原发肿瘤的%,人群发生率颍暾叨嗉=昀矗孀畔晕⑸窬饪尤其是经鼻蝶入路手术目U埂⑸窬跋裱Ъ际醯慕降仁沟么固辶龅牧俅膊±飨栽龆啵已成为神经外科的常见病及多发病。垂体瘤主要可引起头痛、视力视野等重要感官功能的损害及内分泌功能紊乱,影响病人的生长发育、劳动能力及生育功能。而巨大的侵袭性垂体腺瘤可导致下丘脑症状和脑积水等,威胁病人生命。目前对垂体瘤一般采取手术、药物及放疗相结合的综合治疗,但术后仍有相当多的复发病例,即使手术全切除肿瘤的患者,亦有相当一部分患者遗留难以恢复的神经功能障碍或内分泌症状。况且细致的显微研究表明,约%的垂体瘤有显著的硬膜侵犯而无法全切D壳按体瘤的诊治仍是神经外科领域的难题之一垂体瘤的发病机制仍不清楚,长期以来一直存在分歧。随着现代内分泌学、病理学、放射医学及分子生物学的迅速发展,对垂体腺瘤的认识已经达到分子和基因水平。目前对垂体腺瘤的发病机制有两种假说,一是垂体细胞自身缺陷机制,即单克隆起源学说;二是下丘脑调控失常机制,即肿瘤是下丘脑、垂体功能失调的表现形式之一研究垂体瘤的发病机制与指导垂体瘤的临床诊断治疗密切相关。目前认为垂体瘤的发生发展是一个多步骤、多因子参与的复杂过程,许多基因、蛋白质参与了垂体瘤的发病过程。基因及蛋白:定位于姿峄氖油つ赶赴龅鞍鞍是一个关键的下游效应器,其编码产物可与细胞核中转录因子结合,启动细胞分裂周期在/骺氐悖鹘谙赴只谇贸齊虻脑雍献小鼠中几乎ビ写固辶龅姆⑸】。另外即使明显的启动子或者其蛋白结合点甲基化后,有些肿瘤仍可表达蛋白,提示的功能改变亦在垂体瘤的发生机制中扮演重要角色】。窬腨神经肽荰紫确掷胩岽康挠霭被嶙槌傻多肽。在下丘脑神经核团中合成,通过垂体门脉系统与垂体细胞结合,直接调控增高,说明不同种类的垂体腺瘤受牡骺刈饔贸潭炔灰恢隆6鳶等免疫组化方法研究后,提出苡氪固逑赴湍そ岷洗碳ひ蜃覩结合蛋白◆●刚晶
和转移有抑制作用。掣结合造成蛲槐洌佣瓜佘账峄坊富钚院突妨姿嵯佘铣稍加,激活细胞内钙离子和依赖蛋白激酶活性,导致细胞生长分化而形成肿固逑倭鲎;篜蛭挥嗦氲鞍字屎个氨基酸,其功能是调节碱性成纤维因子的分泌和抑制染色单体的分离。至少通过条途径影响肿瘤的发生:甈氤上宋赴ひ蜃纬烧蠢⊥路,刺激肿瘤血管生成,。缺泶颬岬贾路钦度旧宓某鱿趾拖赴;并可活化蛞鹣赴蛲鰌S惺笛楸砻鳎谝追⑸固辶龅腞;蛐鼠中若敲除杉趼固辶錾に俣菼堰式岷弦蜃虼嬖诹街盅切汀和。对多种肿瘤的生长⑾智窒源固辶霾∪说膎亚型表达减少,并与海绵窦侵袭呈高度负相关,但逆转录聚合酶链反应甈约癉测序均未发现异常的基因结构。推测其表达异常发生在转录调节水平。其抑制肿瘤细胞的机制可能因为它与人类核酸二磷酸激酶的氨基酸序列具有高度的同源性。其蛋白减少,一方面使微管聚合异常而导致肿瘤细胞染色体非整数倍的形成,进而促进肿瘤发展;另一方面通过影响细