微生物发酵工程案例教学.ppt

Engineered Saccharomyces cerevisiae that produces 1,3-propanediol from D-glucose
工程化啤酒酵母细胞利用D-葡萄糖生产1,3-丙二醇
文献查找：张帆
文献翻译：曾熙、朱悦、张帆
PPT整理及展示：张艳丽（组长）
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二、背景
三、实验方法
一、摘要
四、实验结果
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摘要
在发酵产业中啤酒酵母是一种安全的微生物。1,3-丙二醇是一种广泛用于聚合物生产的重要化学原料，但是由于化学合成成本昂贵，它的实用性受到限制。本研究的目的就是利用工程化啤酒酵母低成本生产1,3-丙二醇。
啤酒酵母利用D-葡萄糖作为原料，能够生产丙三醇，-丙二醇。在本研究中，我们克隆了两个基因yqhD和dahB，这两个基因可以使丙三醇转化成1,3-丙二醇，把这两个基因通过农杆菌转化实验整合到啤酒酵母的W303-1A染色体上。这个工程化的啤酒酵母通过功能性yqhD和dhaB基因来实现D-葡萄糖到1,3-丙二醇的生产。
据了解，该研究在1,3-丙二醇生产产业中是一种安全的、低成本的方法。
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背景
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背景
使用与成
本的矛盾
化学合成
发酵
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背景
克雷伯肺炎菌：在克雷伯肺炎菌中，参与1,3-丙二醇的生物合成的基因是dhaB和dhaT。DhaB是一种依赖维生素B12的脱水酶，它转化丙三醇到3-羟基丙醛，而DhaT是一种依赖NADH的氧化还原酶，它可以转化3-羟基丙醛到1,3-丙二醇。
大肠杆菌：大肠杆菌能利用D-葡萄糖生产丙三醇，可以通过把dhaB和dhaT基因整合到大肠杆菌来生产1,3-丙二醇，但是DhaT活性过低，导致收率低。yqhD基因的发现解决了这一问题。
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背景
克雷伯肺炎菌的生产原料是丙三醇，价格昂贵。
大肠杆菌产生内毒素，可能引起疾病。
啤酒酵母已经用于发酵产业好多年了，主要是由于它使用D-葡萄糖这种低成本原料作为碳源和能源。
野生型啤酒酵母只产生丙三醇，但没有产生1,3-丙二醇的能力。
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背景
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实验方法
一、材料：PCR试剂、限制酶、小牛碱性磷酸酶、凝胶提取盒、尼龙膜等
二、培养基和生长条件
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