荧光光谱法检测乙肝病毒HBVDNA和凝血酶研究.pdf

鍪篮茬荧光光谱法检测乙肝病毒瓺和凝血酶的研究学位论文完成日期:指导教师签字:答辩委员会成员签字:.
荧光光谱法检测乙肝病毒湍酶的研究摘要乙肝病毒是当前传染性很强的一种病毒,可引起慢性肝炎和肝硬化。因此,发展一种高灵敏的和高选择性的检验乙肝病毒的方法成为热点课题之一。凝血酶是一种常见的蛋白质,它在分子生物学中起着重要的作用,许多工作都致力于发展灵敏度高的凝血酶传感器。核酸适体与靶分子之间分子的识别功能与抗体与抗原的识别非常相似,作为一种新型的分子识别工具,可以与适配体作用的靶分子种类很多括免疫原性弱及不具有免疫原性的物质和毒素保怂崾侍寰哂凶陨砦榷ㄐ强、易功能化修饰、变性复性快速、可逆标记和可作为优良的纳米器件等优点。因此,核酸适体作为识别分子的分析技术得到迅速的发展。本论文主要分为以下四个部分:煤怂嵬馇忻窱降解杂交的矗ü馑匦奘蔚腄探针释放到溶液中,通过测定溶液的荧光强度来测定乙肝病毒呐ǘ取?疾炝缓冲溶液的种类、、反应时间等对反应体系荧光强度的影响,确定了最佳反应条件:最佳缓冲溶液为缓冲溶液缓冲溶液的最佳为甇,,体系的荧光强度明显增强。ü馑氐男藕臘连接在纳米金表面,纳米金通过氪胖榱樱,蛩仗谴可以替代信号接在纳米金表面,使荧光素标记的信号牙肽擅捉鸬饺芤褐校舛ㄈ芤旱挠光强度可以得到呐ǘ取4胖椴唤隹梢杂美创判苑掷耄箍梢越档虳的非特异性吸附。同时,纳米金有放大信号的功能。基于纳米金放大原理的荧光光谱体系中测定的募觳庀尬.×。猛扛睬缀退氐装搴湍擅捉鸫判晕⑶蚶醇觳釮的浓度。纳米金磁性微球不仅可以放大信号,还可以利用其可磁性分离的特点减小非特异性吸附。利用娣从Γ沟眯奘斡ü馑氐男藕臘脱离纳米金磁性青岛科技大学研究生学位论文..觳庀尬.×以以.,
微球表面悬浮在溶液中,通过荧光光谱法测定溶液中的荧光强度来得到的浓度。信号的放大和低背景使得该方法检测限为捎糜谒媸奔觳呐ǘ取谀C赣肫淞街质侍逯涮匾煨越岷仙杓屏硕至槊舻暮吞匾煨缘募心结构来检测凝血酶的浓度。连接在纳米金表面的识别胍可部分杂交,由于取代胧侗餌可完全杂交,从而引发皇放到溶液中。溶液中的可打开发卡,被打开的又可以打开发卡而释放重新回到溶液中,释放到溶液中的可打开引发下一轮循环反应。这样的循环反应可增大荧光信号,提高检测的灵敏度,检测限为×S门血清蛋白和溶菌酶来检验该方法的选择性,结果表明,该方法具有足够高的选择性,同时,在实际样品中也有很好的选择性。关键词:乙肝病毒;凝血酶;核酸适体;核酸外切酶耗擅捉鹆W樱挥ü夤馄荧光光谱法检测乙肝病毒湍C傅难芯
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目录第一章前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一乙型肝炎概述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯凝血酶与适体⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯纳米金概述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一荧光分析法及磁性分离技术⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯课题立项依据及研究内容⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯第二章基于核酸外切酶Ⅲ降解原理荧光检测乙肝病毒实验部分⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯··.倚透窝琢餍邢肿醇拔:Α慕峁埂牟《净蜃椤难芯考癏基因分型方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·.⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.适体的特点⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.适体与配体的相互作用⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯”.适体技术的应用⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..ü.
结果与讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯第三章纳米金放大法荧光检测实验部分⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·结果与讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.修饰荧光素的信号挠ü⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.舛℉的工作曲线⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·.ü夥ḿ觳釮原理⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯”.缓冲溶液最佳的选择⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯