促红细胞生成素治疗宫内感染致新生大鼠脑白质损伤研究.pdf

浙江大学医学院
博士学位论文
促红细胞生成素治疗宫内感染致新生大鼠脑白质损伤的研究
姓名:沈盈
申请学位级别:博士
专业:儿科学
指导教师:俞惠民
20090401
促红细胞生成素治疗宫内感染致新生大鼠脑白质损伤的研究中文摘要浙江大学医学院博士研究生导师儿科学沈俞惠民教授盈早产儿脑白质损伤,被认为是脑瘫发生的最主要的危险因素,给家庭和社会带来了巨大的负担。目前,早产儿幕粕胁十分清楚,流行病学和动物实验研究均表明宫内感染在早产儿姆⑸中起重要作用。牟±硖氐阒饕J悄园字实哪绦曰邓溃邓啦课怀鱿址从性星形胶质化、少突胶质细胞的丢失、髓鞘损伤和轴突损害。近年来研究认为,姆⑸肽阅谙赴蜃拥墓叵捣浅C芮小O赴蜃幽芤远嘀只频贾履园字损伤:鹕松偻唤褐氏赴⑿切谓褐氏赴⑺;榈家谎趸琋的神经毒性作用等。宫内感染导致早产儿幕瓶梢酝撇馕S上赴蜃咏榈嫉囊幌盗心组织中各种细胞和蛋白合成的变化所致。近年来的研究发现促红细胞生成素珽谀院推渌嗥髦具有促红细胞生成以外的其它重要功能。赡茏魑R恢种惺嗌窬低逞字⒉理变化中的保护性细胞因子,对脑内的免疫反应有保护作用,这一作用可能通过影响脑内细胞因子的合成并发挥生物效应来实现。研究表明外周静脉或腹腔内注入重组人促红细胞生成素,能通过血脑目的:浙江大学博士学位论文摘要
屏障而直接在脑内产生神经保护作用。目前国内外对肽运鹕说墓叵导盎研究主要集中于匀毖跞毖P阅运鹕说纳窬;ぷ饔茫鳨与早产儿墓叵狄约跋喙鼗蒲芯磕壳叭越仙佟因此,本研究通过建立宫内感染导致男律笫竽P停⒏诟腥竞的新生大鼠腹腔注射一定剂量的鄄靣干预对宫内感染后的新生大鼠脑白质中的’一环核苷姿岫’⑸窬⑺琋和胶质纤维酸性蛋白珿表达水平的影响;观察稍ざ怨诟腥竞蟮男律笫竽阅细胞因子和诱导型一氧化氮合酶,幕虮达以及含量的影响,从细胞、分子水平来说明怨倌诟腥镜贾碌男律鼠赡艽嬖诘闹瘟谱饔谩8醚芯拷A俅仓瘟圃绮鵚提供丰富的动物实验信息及依据,为今后进一步研究早产儿姆乐翁峁┬碌耐揪丁方法:笛榉肿椋憾哉兆閘组⒍哉兆组⒐诟腥咀、宫内感染低剂量治疗组组⒐诟腥屑亮恐瘟谱、官内感染高剂量治疗组组孔只孕鼠。对照组U6照,对照组Lチ斓脑惺笞笥伊讲喙倬蹦诒缸⑸渖硌嗡.,官内感染组为胎龄天的孕鼠左右两侧宫颈内各注射大肠杆菌稀释液,宫内感染低小⒏剂量治疗组为宫内感染母鼠分娩后,新生大鼠于生后即刻腹腔注射/瓯静杉喊凑招律、日龄分别随机选取各组中的新生大鼠经断头处死,迅速取出脑组织,将脑组织中性甲醛固定、石蜡包埋,或将脑组织经液氮速冻后一冰箱中保存。笛榉椒ǎ河τ盟漳舅兀梁琀染色观察各组新生日龄大鼠脑室周围白质组织病理变化特点。免疫组化染色检测各组新生、浙江大学博士学位论文摘要,Ⅱ
樟浯笫竽宰橹疌虶谋泶铮琖检测各组新生、樟浯笫竽宰橹疌虶牡鞍姿剑ü舛縍觳飧髯新生、樟浯笫竽阅谙赴蜃又琢龌邓酪蜃白细胞介素,、巨噬细胞炎性蛋白的表达,硝酸还原酶法检测各组新生、樟浯笫竽阅诘腘俊结果:辉惺蠡疃⒔尘#例发生死亡。孕鼠分娩情况:楣只幼鼠,楣挥资螅珻组共只幼鼠,楣挥资螅珽组共只幼鼠,组共只幼鼠。宫内大肠杆菌感染的孕鼠子宫壁及胎盘内血管充血、水肿,并见大量中性粒细胞浸润。对照组的孕鼠子宫及病理检测均未见明显的炎症反应。律日龄大鼠脑室周围白质部位染色可见:两组脑白质组织结构正常,染色清晰;两组脑白质染色淡,结构稀疏呈筛网状改变;槟园字染色偏淡,结构稀疏化程度较橛兴跚幔籉组脑白质染色清晰,结构稀疏化程度较槊飨约跚帷诟腥竞蟮男律日龄大鼠脑组织、表达显著下降,疗使宫内感染后的新生樟浯笫竽宰橹疌泶镉兴仙组新生龄大鼠脑组织、蛋白水平较两组均显著降低,两组蛋白水平则较橄灾撸現组蛋白水平亦较橄灾摺9倌诟腥竞蟮男律日龄大鼠脑组织表达显著上升,瘟剖构诟腥竞蟮男律日龄大鼠脑组织表达有所下降。樾律日龄大鼠脑组织蛋白水平较两组显著升高,镚鞍姿皆蚪螩组显著降低。诟腥竞笮律日龄大鼠脑内【的表达水平显著升高,中、高剂量的瘟剖构诟腥竞笮律日龄大鼠脑内瓽的表达水平显著下降。,【、琈、和浙江大学博士学位论文摘要
因子级联反应在啪的发生、发展中起着关键作用。中、。宫内感染后新生日龄大鼠脑内的表达水平显著升高,高剂量的瘟剖构倌诟腥竞笮律鷏、。,中、高剂量的瘟剖构诟腥竞笮律日龄大鼠脑内的表达水平显著下降。倌诟腥竞笮律、樟浯笫竽阅趇的表达水平显著升高,中、高剂量的瘟剖构诟腥竞笮律、樟浯笫竽阅趇的表达水平显著下降。宫内感染后新生日龄大鼠脑内含量显著升高,高剂量的治疗使官内感染后新生日龄大鼠脑内含量显著下降。结论:苯又执蟪Ω司⒌