2021年自己翻译的罗氏tunel检测细胞凋亡试剂盒新版说明书.doc

罗氏tunel检测细胞凋亡试剂盒说明书
800-820-0577
注意：Label溶液含有甲次砷酸盐和二氯化钴，严禁吸入和食入。
反应悬浮物搜集于密闭、不易碎、有明确标识容器中，按有毒废物处理。
试剂盒组成：
小瓶/盖子
标签
内容物
1 蓝色
酶溶液
大肠杆菌重组牛胸腺末端脱氧核苷酸转移酶，在storage buffer中
10×conc.
5×50ul
2 紫色
标识溶液
在reaction buffer中核苷酸混合物
1×conc.
5×550ul
3 黄色
转化-POD
抗荧光素抗体，绵羊Fab片段，连接有辣根过氧化物酶
Ready-to-use

需要自己配置其它物品：
除上表所列试剂外，还需准备以下溶液。下表列出每步所需物品概览：
步骤
设备
试剂
样品准备section
黏附细胞，细胞涂片和细胞离心涂片准备

Washing buffer：磷酸缓冲液PBS*
Bloking buffer封闭缓冲液：溶于甲醇3%H2O2
Fixation solution固定剂：溶于PBS4%多聚甲醛，，新鲜配制
Permeabilisation solution渗透溶液：%%Triton X-100，新鲜配制（6）
固定剂
石蜡包埋组织
二甲苯和乙醇（浓度：95%，90%，80%，70%，溶于双蒸水中）
Washing buffer：PBS*
蛋白酶K*，不含核酸酶，工作浓度：[10-20ug/ml，溶于
10mM Tris/HCL中，-8]
替换处理方案
※渗透溶液：（%Triton1） X-100，%柠檬酸钠，新鲜配制
※胃蛋白酶*（%-%，溶于盐酸中，ph2）或胰蛋白酶*， HCL，不含核酸酶
※，ph6，微波照射
标识步骤
阳性对照
微球菌核酸酶或
DNase I，重组，等级1*
黏附细胞，细胞涂片和细胞离心涂片和组织
Parafilm石蜡封口膜或盖片
湿盒
Washing buffer：PBS*
Difficult tissue 困难组织
塑料容器
微波
湿盒
Citrate buffer柠檬酸盐缓冲液，，
Washing buffer：PBS*
Tris-HCL， ，含3%BSA*和20%正常牛血清
信号转换
湿盒
Parafilm石蜡封口膜或盖片
Washing buffer：PBS*
DAB Metal Enhanced Substrate Set*DAB金属增强底物*或POD底物替换物
光镜镜检封固剂
产品概述：
特异性：TUNEL反应优先标识凋亡产生DNA链断裂，从而分辨凋亡和坏死、和由抑制细胞生长药品或放射线产生primary DNA链断裂
试验干扰：假阴性：在一些型式凋亡细胞中DNA链断裂可能缺失或