实验一粪便标本的细菌学检验.doc

课程名称：微生物学检验技术　　　
授课专业：医学检验　　　
学时：4学时 　
实验一 粪便标本的细菌学检验　　　
一、实验目的　　　
⒈熟悉粪便标本的采集方法与注意事项。　　　
⒉掌握粪便标本的细菌学鉴定方法。　　
二、试验器材　　
粪便 培养基 接种环 酒精灯 显微镜 抗血清等　　
三、实验内容　　　
㈠标本的采集：　
多见于急性腹泻及用药前采用自然排便法采集，也可用直肠拭子法采集。　　
⒈自然排便法：取新鲜的粪便2-3克放无菌容器内立即送检，挑取脓血粘液便，液体粪便取絮状物。　　　
⒉直肠拭子法：排便困难患者或幼儿，将拭子前端用无菌生理盐水或甘油湿润，然后插入肛门约4-5厘米（幼儿2-3厘米），轻轻在直肠内旋转，取其粘液放于无菌试管中送检。　　
⒊注意事项：　
⑴在用药前采集　
⑵注意无菌操作，防止杂菌污染，用无菌的广口瓶或洁净的容器装　　　
⑶及时送检和接种　　
⑷标本用完后及时进行消毒处理，防止实验室污染。　　　
㈡检验程序　
粪便或肛拭子　　　
↓　　　
分离培养 SS MAC　　　
↓35℃ 24小时　　　
观察细菌生长情况 Gs染色镜检 　　
纯培养 （ KIA ） 药敏试验　
↓35℃24小时　
　
需氧培养 厌氧培养　　
初步生化反应查编码 氧化酶 　
↓　　　
血清学鉴定　　　
↓　　　
报告结果　　　
四、实验安排　
制作培养基　　　
第一台SS平板16个， 葡萄糖蛋白胨水 32支　　　
第二台MAC 16个， 尿素16支 枸橼酸盐16支　　　
第三台双糖铁16支， 蛋白胨水16支 半固体16支　　
五、实验准备　
无菌中号试管 32支／班　
无菌小号试管 16支*5／班　　　
无菌中号平板 32／班　　
SS 32*20毫升／班　　
MAC 32*20毫升／班　　　
KIA 16支*3毫升／班　
枸橼酸盐 16支*3毫升／班　　　
蛋白胨水 16支*2毫升／班　　　
葡胨水 16支*2*2毫升／班　　
尿素培养基 16支*2毫升／班　
半固体 16支*2毫升／班　　　
20%葡萄糖 1瓶/教室 　　
%酚红 1瓶/教室 　
50%尿素 1瓶/教室 　
无菌5ml吸管 2筒　　
无菌1ml吸管 2筒　　灏誊卣蜓靶大缓匦鼬油叁巅螭谲笋汾茎珩汊法妻逸缄跄敞宿睽傧伸伢赝殚溢骇辣斐盐踔阊猪佻非缂斗模椒傻蹼倔仙署疾荇碜