课程名称:微生物学检验技术授课专业:医学检验学时: 4学时实验一粪便标本的细菌学检验一、实验目的⒈熟悉粪便标本的采集方法与注意事项。⒉掌握粪便标本的细菌学鉴定方法。二、试验器材粪便培养基接种环酒精灯显微镜抗血清等三、实验内容㈠标本的采集: 多见于急性腹泻及用药前采用自然排便法采集,也可用直肠拭子法采集。⒈自然排便法:取新鲜的粪便 2-3 克放无菌容器内立即送检,挑取脓血粘液便,液体粪便取絮状物。⒉直肠拭子法:排便困难患者或幼儿,将拭子前端用无菌生理盐水或甘油湿润,然后插入肛门约 4-5 厘米(幼儿 2-3 厘米) ,轻轻在直肠内旋转,取其粘液放于无菌试管中送检。⒊注意事项: ⑴在用药前采集⑵注意无菌操作,防止杂菌污染,用无菌的广口瓶或洁净的容器装⑶及时送检和接种⑷标本用完后及时进行消毒处理,防止实验室污染。㈡检验程序粪便或肛拭子↓分离培养 SS MAC ↓35℃24小时观察细菌生长情况 G s染色镜检纯培养( KIA )药敏试验↓35℃24小时需氧培养厌氧培养 初步生化反应查编码氧化酶↓血清学鉴定↓报告结果四、实验安排制作培养基第一台 SS 平板 16个, 葡萄糖蛋白胨水 32支第二台 MAC 16个, 尿素 16支枸橼酸盐 16支第三台双糖铁 16支, 蛋白胨水 16支半固体 16支五、实验准备无菌中号试管 32支/班无菌小号试管 16支*5/班无菌中号平板 32/班 SS32*20 毫升/班 MAC 32*20 毫升/班 KIA 16支*3毫升/班枸橼酸盐 16支*3毫升/班蛋白胨水 16支*2毫升/班葡胨水 16支*2*2 毫升/班尿素培养基 16支*2毫升/班半固体 16支*2毫升/班 20% 葡萄糖 1瓶/教室 % 酚红 1瓶/教室 50% 尿素 1瓶/教室无菌 5ml 吸管 2筒无菌 1ml 吸管 2筒
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