apoE基因敲除动脉粥样硬化小鼠中枢、心脏和肝脏生物钟基因表达改变的研究.pdf

後旦大擎硕学位论文士基因敲除动脉粥样硬化小鼠中枢,心脏和肝脏生物钟基因表达改变的研究业:研究生姓名:侯立坤导师:钱睿哲副教授导师组成员:金惠铭教授陈思锋教授陆超讲师院系:上海医学院专病理学与病理生理学年荩琻·’
尸录目中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯”言⋯⋯⋯⋯⋯⋯·⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·”⋯·⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯···材料和方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..附:载体构建⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一言”·⋯⋯一·””⋯⋯·一····⋯⋯⋯·······”····”·····”⋯⋯⋯⋯⋯“”””⋯”讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯综帧薄薄致谢⋯⋯⋯⋯⋯”⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·年复曼大学引结果⋯⋯·⋯一········”···”·⋯·””··⋯·“··”········⋯···········⋯·⋯⋯”⋯””⋯¨讨论···””⋯⋯⋯⋯⋯···”⋯·“”·⋯⋯⋯⋯⋯·········一··”···⋯··⋯⋯···”···⋯·”结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯
晨高发。其发病机制目前尚不清楚。这些疾病主要是动脉粥样硬化鷖辳,抵⒅蟹基因敲除动脉粥样硬化小鼠中枢,心脏和肝脏生物钟基因表达改变的研究达,而对生理功能的调节是各钟基因通过调控下游钟控基因岫中文摘要们托脑葱遭昼夜节律生物钟疵子分泌以及进食行为等,昼夜节律产生的分子基础来源于生物钟基因锄参与机体各项生理功能的调节,如血脂、血压、碳水化合物代谢、激素ㄒ鹊核亍⑹菟亍⑻瞧ぶ仕氐分泌、凝血因涞男鞅泶铮醋B迹敕蠢』仿贰V惺嗌镏踊蛭挥谙虑鹉允交叉上核琒庵茏橹灿欣嗨频纳镏踊虮珻的表达来实现的。已有研究表明一些钟基因表达的改变参与到疾病的发生发展,如心血管系统疾病、神经系统疾病、肿瘤等。在心血管系统疾病中,急性心肌梗塞⒉【哂忻飨缘闹缫菇诼桑谠闹漳┢诓⒎⒅ⅰ6鲋嘌不且恢侄嘁蛩夭斡氲穆约膊。洳∫蚋杂包括炎症、细胞凋亡与增殖、脂质代谢紊乱等。其中脂质代谢紊乱是其重要的代谢性危险因素。在正常情况下,生物钟通过调控下游与脂质代谢相关钟控基因的表达,参与脂质代谢。当这个调控通路发生异常时,可引起血脂异常,胰岛素抵抗,肥胖,高血压等。血清中血脂增高尤其氧化型纳叽偈挂恍┭字介质、自由基释放增加,影响内皮细胞功能,引起血管壁炎症,易于脂质沉积于内皮下,炎症因子如血管细胞粘附分子一一选择素等促使单核细胞进入内皮下,分化为巨噬细胞,吞噬脂质后转化成泡沫细胞,促进脂纹的形成,内皮细胞的过度凋亡,使得脂质沉淀增多,斑块增大,血管平滑肌的凋亡不足,使得血管壁增厚变硬,斑块易于破裂,导致血栓性疾病的发生。同时生物钟基因还参与细胞凋亡与增殖、炎症反应、凝血功能、血压等的调控,而这些功能的异常与动脉粥样硬化的发生有关,那么作为动脉粥样硬化危险因素之一的脂质代谢紊乱是否对生物钟基因的表达有影响壳肮谕獾谋ǖ澜仙伲颐且酝难芯糠⑾郑琣
染色检测动脉粥样斑块;利用也外Ⅱ小琺琺和Ⅺ驛水平的表达均呈现昼夜节律,而只同龄雄性∈笞魑6哉眨軨硫鷑緀美雌拦郎、他鍪奔涞愦λ佬∈=峁允靖杵胀ㄒ车挠/.小鼠尚基因敲除/动脉粥样硬化小鼠模型中,心脏生物钟基因和钟控基因表达紊乱。有研究表明,高脂饮食能够影响小鼠生物钟基因的表达,而生物钟基因参与脂质代谢的调节,所以我们推测在小鼠动脉粥样硬化形成过程中,生物钟基因表达节律的改变可能与脂质代谢紊乱有关,生物节律的紊乱又影响脂质的代谢,从而形成脂质代谢的恶性循环,导致动脉粥样硬化的发生发展。为此,我们利用小鼠,分别给予普通和高脂饮食,建立动脉粥样硬化的早期和进展期动物模型,检测与脂质代谢密切相关的肝脏组织、与动脉粥样硬化发生密切相关的心脏组织、参与调控各项生理功能的中枢组织钟基因的表达节律变化,研究动脉粥样硬化病理过程中引起生物钟基因表达变化的机制,进一步研究脂质代谢与生物钟基因之间的关系,为研究动脉粥样硬化的发病机制提供新的理论依据。本课题采用只铝涞男坌杂/∈螅治A阶椋孔唬小时光照/小时黑暗/的环境下饲养埽笞H∈焙诎担∈黑暗/环境下继续饲养堋R蛔楦杵胀ㄒ常蛔楦韪咧常体内在生物学时间,欢ㄎV鞴坌栽绯浚珻欢ㄎV鞴坌砸雇,分别在固醇、瓹、瓹的含量;取小鼠主动脉起始段做冰冻切片,油红。觳馄胀ㄒ澈透咧秤与∈笾惺唷⑿脑嗪透卧嘀踊,出,,未形成明显的粥样斑块,但其主动脉内皮下已经形成脂肪泡沫细胞,血清总胆固醇和瓹明显增高,瓹则明显降