玉米抗氧化肽分离制备及其体外抗氧化活性研究.pdf

沈阳农业大学
硕士学位论文
玉米抗氧化肽的分离制备及其体外抗氧化活性的研究
姓名:张强
申请学位级别:硕士
专业:生物化学与分子生物学
指导教师:陈红漫
20050601
摘要本论文对玉米抗氧化肽制备的最佳酶解条件、影响因素,玉米抗氧化肽的分离纯化、氨基酸组成及其体外抗氧化活性进行了研究。采用单因素试验和正交试验方法,研究中性蛋白酶和碱性蛋白酶水解玉米蛋白粉制备玉米抗氧化肽的最佳酶解工艺。试验结果表明:制备玉米抗氧化肽碱性蛋白酶优于中性蛋白酶;以碱性蛋白酶制备玉米抗氧化肽的最佳酶解条件为:,琜/卜%,时间,温度。ú钪捣从吵龈饔跋煲蛩氐呐帕兴承蛭#簆痆时间露龋耸钡乃舛任ァ采用饣乖ā。一脱氧核糖法和两种体外动物实验模型研究了玉米抗氧化肽的抗氧化作用,结果表明:玉米抗氧化肽对超氧阴离子自由基和羟基自由基有很强的清除作用,清除率分别为.%和.%,并且能显著地抑制河盏嫉暮煜赴趸苎7从Φ姆⑸虲—激发的正常组织匀浆中桑;は赴妥橹恼I砉δ堋以虳阄龃炕衩卓寡趸模杞篏薄层层析确定其纯度,氨基酸自动分析仪测定其氢基酸组成。结果表明:玉米抗氧化肽经和一柱层析后基本上得到了纯化;氨基酸组成分析表明,玉米抗氧化肽由种氨基酸组成,含有秩颂灞匦璋被、加衩卓寡趸陌被嶙芎康ァVЯ窗被酸含量丰富,。关键词:玉米蛋白粉;抗氧化肽;分离纯化:氨基酸组成沈阳农业大学硕士学位论文
一、生物活性肽概述生物活性肽的性质及生理功能吾月生物活性肽,侵敢恢址肿恿啃。构象上松散,具有特殊生理活性的肽类吕枇。按它们的来源可主要分为两大类,即天然存在的活性肽和蛋白酶解活性肽庞裰杏胧ο东,年的诺贝尔生理学奖颁给了第一位发现多肽生长因子的科学家,以表彰他为基础科学研究开辟了,一个具有广泛重要性的新领域∮窈煊肓豕权,H嗣堑难芯糠⑾郑死嗌闳氲牡鞍字示缸饔煤螅皇窍以前认为的那样,仅以氨基酸的形式吸收,更多的是以小肽摹⑷牡的形式吸收,以游离氨基酸形式吸收的比例很小。且肽比游离的氨基酸消化更快、吸收更多罱ň撼吕〉龋。这表明肽的生物效价和营养价值比游离氨基酸更高。自此,肽被吸收的观点及其生理功能才引起人们的重视,其相关研究也变得活跃起来。许多低肽不仅能提供人体生长、发育所需的营养物质与能量还具有防治疾病、调节人体生理机能的重要功能。这些功能是原食品蛋白质或其组成氨基酸所不具备的,这也是目前生物活性肽引起当今食品学术界广泛重视的重要原因之一。蛋白质营养价值的评述也从蛋白质的消化性,氨基酸的组成及含量发展到蛋白质序列中某些特定小肽的生理保健功能上来。实现了蛋自质生物化学、生理与营养学的一大飞跃。肽是蛋白质的结构片段,是氨基酸的有机合成物,因此从严格意义上来讲,肽和蛋白质没有十分严格的区分,只是肽链长短的区别。但是肽的性质及功能与蛋白质也是有些不同的。小分子的短肽具有良好的溶解性,在受热或酸碱离子浓度条件下抗凝性好,即使是在高浓度条件下仍具有较好的流动刖占
生物活性肽研发的理论依据性和热稳定性,而且相对于游离氨基酸形式具有吸收快、耗能低、载体不易饱和等特点罡晃埃。生物活性肽的生理作用主要表现在以下几个方面:鹘诩に氐姆置冢调节免疫力;菌;拱呈味:结合矿物质,促进矿物质吸收;寡趸抗高血压。随着对活性肽功能研究的不断深入,人们发现当人体缺乏某些人体生理机能肽时会导致人体机能的失调。因此在以营养为基础的食物能满足人体必须氨基酸的需要后,适当补充某些活性肽对提高体质、增强防癌抗病的能力具有深远的意义。匾P现代人们的生活节奏加快,生存竞争激列,情绪压力加大,现代通信工具、家用电器、室内装修等多种复杂因素对人体的伤害以及现代入饮食节构给人们带来的“富贵病”等因素的影响使人体的生物功能紊乱,急需生物活性肽的补充以改善现代人的健康状态。生物活性肽由于具有吸收速度快、耗能低、载体不易饱和等优点,且具有极强的活性和生物多样性,可全面调节人体生理机能,所以它优于氨基酸、蛋白质、低聚糖等物质而被人们所青睐,成为现代人生活的必需品。赡苄首先,构成蛋白质的氨基酸有种,由它们组合和排列而成的肽类是无穷的。因此,研发生物活性肽在品种的数量上是不成问题的。其次,有些天然蛋白质分子量很大,但经研究发现它们的活性部位却小的多,现在科学家已经逐渐注意到:在营养蛋白的多肽链内部可能普遍存在着功能区,选择适当的蛋白酶水解这些多肽,有可能将其释放出来,从而制各各种各样的生物活性肽庸悴。沙中沈阳农业大学硕宦畚
目前生产生物活性肽的方法及存在问题生物活性肽的研究现状及应用前景和中国已经开始使用糖肽辅助治疗肿瘤,其作用机理就是使淋巴系统活化。随着研究和应用的不断发展,还可以根据蛋白质中心结构,经改造和修饰,得到一系列结构各异的小肽,它们已被用作一些酶的抑制剂,受体拮抗剂及激动剂