高效液相色谱法(20).ppt

第八章 高效液相色谱法
High Performance Liquid Chromatography (HPLC)
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概述
第八章 高效液相色谱法
高效液相色谱仪
主要分离类型和原理
高效液相色谱固定相
高效液相色谱流动相
影响分离的因素
分离类型的选择
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概述
1. 高效液相色谱法
在经典液相色谱基础上，引入气相色谱的理论而发展起来的，以液体为流动相的现代柱色谱分离分析方法。
HPLC:采用高压输液泵，高效微粒固定相和高灵敏度检测器。
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经典LC
HPLC
柱之内径
1~5cm
~
长度
50~100cm
15~50cm
填充材料粒度
150µm~200µm
4µm~10µm
使用压力
1~10atm
50~200atm
分离时间
~天
~1h
2. 高效液相色谱和经典液相色谱的比较
概述
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概述
3. 高效液相色谱和气相色谱的比较
分析对象及范围：
GC——气体和低沸点的稳定化合物 ——只占有机物总数的20%；
HPLC——高沸点、高分子量的稳定或不稳定化合物——占有机物总数的80%。
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概述
流动相的选择：
GC——有限的几种“惰性”气体，只起运载作用，对组分作用小；
HPLC——液体或各种液体的混合——除了起运载作用外，还可与组分作用，并与固定相对组分的作用产生竞争，即流动相对分离的贡献很大，可通过溶剂来控制和改进分离。
操作温度：GC需高温；HPLC通常在室温下进行。
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概述
4. 高效液相色谱法的特点
 高柱效
优点：“三高” “一快” “一广”
 高灵敏度
 高选择性
 分析速度快
 应用范围广泛（可分析80%有机化合物）
缺点：仪器设备费用昂贵，操作严格
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概述
5. 高效液相色谱法的适用对象
 高效液相色谱适用于分析高沸点不易挥发的、受热不稳定易分解的、分子量大、不同极性的有机化合物；
 生物活性物质和天然产物；
 合成和高分子化合物，以及无机和有机离子型化合物。
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概述
6. 高效液相色谱法的应用
 生命科学：氨基酸、多肽、蛋白质，核碱、核苷、核苷酸、核酸（RNA、DNA）等生命物质的纯化和分析；
 药物分析：合成药物的纯化及质量控制，中草药有效成分的分离、制备及纯度测定以及临床医学的药代动力学研究中的分离分析。
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概述
食品分析：
①食品本身组成, 特别是营养成分，如糖、有机酸、维生素、蛋白质、氨基酸、脂肪的分析；
②食品添加剂，如防腐剂、抗氧化剂、合成色素、甜味剂和保鲜化学物质的分析；
③食品污染物，如农药残余和黄曲霉素等的分析。
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