氨基酸与多肽
氨基酸的通式和构型(氨基酸,L构型)
几种特殊的氨基酸(酸性、碱性、带芳香环)
氨基酸的两性电离和等电点pI
氨基酸氨基参与的反应(凯式定氮法,烃基化)
氨基酸羧基和氨基参与的反应(茚三酮显色)
氨基酸R基参与的反应(Folin-酚反应 ,二硫键转化)
氨基酸分离分析的原理,蛋白水解制备氨基酸
多肽的命名
常见多肽(谷胱甘肽)
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蛋白质分子结构
一、蛋白质的结构层次
二、蛋白质的一级结构
三、蛋白质的二级结构
四、超二级结构和结构域
五、蛋白质的三级结构
六、蛋白质的四级结构
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一、蛋白质的结构层次
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二、蛋白质的一级结构 Primary structure
1.定义:
蛋白质的一级结构是指蛋白质多肽链中氨基酸的排列顺序(sequence),一级结构的主要连接键是肽键,通常将二硫键也归属于一级结构
2.结构特点:
蛋白质的序列具有方向性,一般书写顺序是从N-端到C-端, 其主要作用是决定蛋白质分子的高级结构和功能
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二硫键的形成
胰岛素的一级结构
蛋白质的一级结构举例
21aa
30aa
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蛋白质一级结构的测定步骤
(亚基与分子间二硫键)
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(1) 样品准备:均一性、纯度、相对分子量、
肽链数目、氨基酸组成
(2) 一般步骤:
单条多肽链准备
至少两套肽段序列测定
蛋白质分子序列重建
一级结构的测定主要用小片段重叠的原理
蛋白质一级结构的测定
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肽链间的结合
非共价键
血红蛋白(四聚体)
烯醇化酶(二聚体)
共价键结合
胰岛素
免疫球蛋白等
蛋白质中肽链的拆离
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非共价键连接的多肽链
温和条件下可以解离
(变性剂或高浓度盐)
通过二硫键连接的多肽链
需要较强的条件将二硫键切断
还原法(巯基化合物)
氧化法(过氧酸)
蛋白质中肽链的拆离
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蛋白质的氨基酸组成分析
蛋白质完全水解后采用氨基酸自动分析仪进行分析
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