不同品种橘皮中的黄酮分析.doc不同品种橘皮中的黄酮分
摘要:目的:检测六种柑橘皮中黄酮类化合物的含量,为天然产物开发提供数据 参考。方法:采用紫外-可见分光光度法和高效液相色谱法分别建立标准品的标 准曲线方程和检测方法。结果:不同品种柑橘皮不仅总黄酮含量相差悬殊,含有 黄酮的种类和各自含量也差别很大。六种柑橘皮苦柑中总黄酮的含量最高,达到 %,新橙皮莒是其黄酮的主要组成部分。结论:进行天然产物的开发, 根据目标物质含量对优良品种筛选是必要的。
关键词:紫外可见分光光度计;HPLC;黄酮;质量检测
1材料与方法
岛津UV-1700紫外可见分光光度计,SK7200HP超声波清洗器,依利特Sinochrom ODS-BP色谱柱( 200mm, 5um), KNAU-ER脱气装置,紫外检测器 (K-2600), N2000色谱工作站,台式离心机(80-2B型),。
甲醇(色谱纯),纯净水,冰醋酸(AR),柚皮莒、橙皮莒标准品(99%);
芦柑、晚熟蜜橘、雪柑、苦柑、纽荷尔脐橙、塔罗科血橙均购自南平。
121样品处理
对不同品种的柑橘洗涤后剥皮,在35°C吹风干燥箱中干燥,然后粉碎过20 m 筛。各称量2g置于500mL的广口瓶中,加入300mL80%的甲醇溶液,浸泡过夜 后超声20min,再放置24h后超声20min,过滤得提取液,并以300mL作为总提 取液体积进行计算。
,溶解于甲醇:5%NaOH=4: 1的混合溶液 中,稀释到不同浓度,以281nm左右最大吸收峰的吸光度A和橙皮莒浓度(C) 为变量,绘制标准曲线,得到回归方程为:A=-, R2=,线性 范围为
〜30ug/mL,加入回收率 %(RSD=%, n=3)。
,加入5%NaOHlmL,再 加80%甲醇溶液定溶。摇匀后,以加有NaOH的80%甲醇溶液为参比测量281 nm 左右最大峰的吸光度A。依照122得来的函数计算提取液中总黄酮的浓度、质 量、百分含量。各测量三次,求平均值。
HPLC标准曲线绘制
分别用橙皮莒、柚皮莒标准品配制成不同浓度的溶液,选择依利特Sinoehrom ODS-BP 色谱柱(, 5um)为分析柱,以甲醇:%HAC=l: 1 作 流动相,,在线脱气,每次进样量为20uL,建立橙皮苜、柚皮 背的色谱峰面积(Y)和浓度(x)为变量的标准曲线方程。
柚皮昔的回归方程为:Y=90812X+31970, R2=,〜 56ug/mL,加入回收率 %(RSD=%, n=3)。
橙皮昔的回归方程为:Y=113277X - 256546, R2=0. 9954,线性范围为4. 0〜 12ug/mL,加入回收率 %(RSD=%, n=3)。
125提取液中橙皮苜、柚皮苜含量测定
把各提取液用流动相稀释到一定的浓度,
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