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小鼠 IL-1 ELISA
用途:
IL-1 是一种单核因子。1972年 Gery 等发现人白细胞培养的上清中含有一种可溶性物质,这
种物质可促进小鼠胸腺细胞对植物血凝素(PHA)的有丝分裂反应。 起初命名为淋巴细胞激活
因子(lymphocyte-activating factor, LAF)或内源性热原质(endogenous pyrogen)、 破骨
细胞激活因子 (osteoclast activating factor)、 黑素瘤细胞生长抑制因子
(melanomagrowth inhibitory factor)等,1979 年国际统一命名为 IL-1。
1. IL-1 的产生 IL-1 可由多种细胞合成和分泌。
(1)单核细胞、巨噬细胞(如腹腔粘连细胞 peritoneal cell,PC)、 树突状细胞等在摄取
抗原抗体复合物后或在抗原提呈过程中可产生 IL-1。在大多数刺激剂刺激外周血单个核细
胞 (PBMC)条件下,IL-1β mRNA 水平要高于 IL-1α mRNA 20~25 倍。
(2)小鼠巨噬细胞细胞系 P388D1、J774、PU5-、 WEHI-3 以及人前单核细胞株 U937 等
在脂多糖(LPS)刺激后都能分泌大量的 IL-1。
(3)表皮细胞、NK 细胞、B 细胞、成纤维细胞、内皮细胞、脑胶质星状细胞、肾小球系
膜细胞(mesangial cell)、滑膜衬里细胞(synovial lining cell)、平滑肌细胞、上皮细胞、
胎盘细胞、白血病细胞、PMN 等在某些条件下亦可产生 IL-1。
许多因素可以直接影响单核-巨噬细胞 IL-1 的分泌:①细胞因子如巨噬细胞激活因子
(MAF)、集落刺激因子(CSF)、IFN-α、IFN-γ 对 IL-1 产生具有增强作用。②LPS、PPD、BCG
和李斯特菌, 葡萄球菌、链球菌外毒素, 活病毒等也是 IL-1 产生的刺激剂。 在外周血中
20pg/ml 内毒素刺激单核细胞即可产生 IL-1,因此在一般培养条件下,由于微量内毒素的污
染可刺激单核细胞分泌 IL-1。10ng/ml LPS 可使单核细胞合成 IL-1 增加 100 倍。③蛋白激
酶 C(PKC)的激活剂乙酸肉豆蔻佛波醇(phorbol myristate acetate, PMA)以及钙离子载体
(calcium ionophore)如A23187 均具有强烈的刺激作用。④皮质类固醇和前列腺素则对IL-1
的产生有抑制作用。
2. IL-1 的分子结构和基因 完整的人 IL-1α 和 IL-1β 基因组分别为 和 。
人和小鼠 IL-1 基因定位于 2 号染色体,均含 7 个外显子。IL-1 前体(ProIL-1)为 31kDa,通
过蛋白水解酶裂解形成成熟的 IL-1 分子。IL-1 在不同种属中有较高同源性。在氨基酸水平
上,IL-1α 和 IL-1β 在不同种属同源性分别为 60%~70%和 75%~78%;但在同一种属中
IL-1α 与 IL-1β 同源性只有 25%。人 IL-1α()和 IL-1β()分别由 159 和 153 个氨基酸
残基组成,分子量约 , 同源性为 28%。IL-1 对糜蛋白酶敏感。 不同细胞所产生 IL-1
的等电点可有所差异。
本试剂盒用于定量检测小鼠血清、血浆、细胞培养上清液、组织液中的 IL-1 的浓度。
原理:
本试剂盒采用双抗夹心 ELISA 法。小鼠标本中的 IL-1 与生物素化的抗小鼠 IL-1 单抗结合,
并且生物素化的抗小鼠
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