发酵工程模块—上游实验贾彩凤 实验目的?进一步理解微生物生产过程的工艺原理, 熟悉生产过程。?掌握微生物发酵罐的结构和操作方法。?学习发酵过程中指标的意义及控制,对微生物生产过程有总体的认识。实验材料?轮枝链霉菌( Streptoverticillium mobaraense ); ?菌种特性: 好氧菌;以无性孢子或菌丝片断进行繁殖; ?发酵生产微生物谷氨酰胺转胺酶(MTGase) 。 TG 酶的应用发酵实验流程图发酵罐和培养基的灭菌菌种活化三角瓶扩大培养发酵罐清洗与检查斜面菌种发酵培养基的配制加入到发酵罐中接种取样发酵罐发酵的同时,用完全相同的条件, 在摇瓶中做平行对照实验。发酵液冷冻离心,取上清,冰箱保存超滤酒精沉淀 SDS-PAGE 电泳粗滤相关知识介绍 1. 培养基孢子培养基、种子培养基、发酵培养基 ,种子的制备,菌龄,接种量 1 32 4 茂原链霉菌生长曲线相关知识介绍 3. 液体深层培养的几个关键点 4. 四联罐介绍 3L 的发酵罐,由罐体、空压机、主机、水源组成。本实验用的发酵罐谷氨酰胺转胺酶(MTGase) 的发酵?轮枝链霉菌接种量: 5~ 10%( v:v) ?培养条件:温度, 30℃;搅拌转速为 200rpm ;通气量, 3vvm (通气量与发酵液体积比-VVM );培养时间: 40h 左右。?监测发酵罐的 T、通气量、搅拌转速等状态,按照一定时间取样。?测定发酵液的 pH 、酶活、甘油含量和生物量。
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