《pcr技术dw》.ppt

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DNAsis DNAstar Vector NT
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余 兴 龙
PCR实验技术
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参考书
-实验指南(第二版)，第14章
-实验指南(第三版)，第8章
3. PCR最新技术原理、方法及应用。黄留玉主编，化学工业出版社，2005年
-理论与方法。张学敏主编。军事医学科学出版社
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PCR技术的创建
Khorana(1971)等提出在体外经DNA变性,与适当引物杂交,再用DNA聚合酶延伸,克隆DNA的设想。美国MIT教授、1968年诺贝尔医学奖得主
1985年,Mullis发明了PCR技术,使Khorana的设想得到实现。(Mullis为美国PE-Cetus)
1988年Saiki等将耐热DNA聚合酶（Taq）引入了PCR技术
1989年美国《Science》杂志列PCR 为十余项重大科学发明之首,比喻1989年为PCR爆炸年,Mullis荣获1993年度诺贝尔化学奖。
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专利官司
1987年美国专利局专利授权
1989年，DuPont异议，大小公司对簿公堂，将决定谁将获得诺贝尔奖。DuPont理由是，1971年PCR的雏形已由Khorana一系列文章阐明，并公布于众，应当是公共产权。斯坦福大学Kornberg（研究DNA聚合酶获诺贝尔奖）也认为，任何具备生物技术知识的人都可以从Khorana等的文章中推知如何操作PCR。
美国专利局驳回DuPont异议，地方法院判属Cetus
Cetus获胜后马上反诉，指出DuPont已侵犯另一项与PCR有关的专利并要求对方赔偿以及不再销售与PCR有关试剂和仪器
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DNA的结构
5′······ATGGTCCGTAAATGCTGCATG ·····3′
3′······TACCAGGCATTTACGACGTAC ····· 5′
方响性：5′ 3′
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