高三生物选修三知识点.doc

高三生物选修三知识点本文由王奕然 1211 贡献 doc 文档可能在 WAP 端浏览体验不佳。建议您优先选择 TXT ,或下载源文件到本机查看。基因工程一、概念又叫基因重组技术,或 DNA 拼接技术,是指按照人们的愿望, 进行严格的设计, 通过体外 DNA 重组和转基因等技术, 赋予生物以新的遗传特性, 创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品二、基本工具 1.“分子手术刀”——限制性核酸内切酶( 限制酶)⑴来源: 主要从原核生物分离纯化⑵作用: 识别双链 DNA 中某种特定的核苷酸序列,并且使特定部位的磷酸二酯键断开⑶结果: 产生黏性末端或平末端 2.“分子缝合针”—— DNA 连接酶⑴ -DNA 连接酶①来源: 大肠杆菌②作用: 将双链 DNA 片段互补的黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来⑵ T4-DNA 连接酶①来源: T4 噬菌体②作用:既可连接黏性末端又可连接平末端,但连接平末端的效率比较低 3.“分子运输车”——载体⑴常用载体: 质粒⑵必备条件:①能在受体细胞中复制并稳定保存②具有一至多个限制酶切位点,供外源 DNA 片段插入③具有标记基因,供重组 DNA 的鉴定和选择⑶其他载体: 噬菌体、动植物病毒三、操作步骤 1. 目的基因的获取⑴目的基因: 主要指编码蛋白质的结构基因⑵方法: ①从基因文库中获取目的基因②利用 PCR 技术扩增目的基因③用化学方法直接人工合成基因文库将含有某种生物不同基因的许多 DNA 片段, 导入受体菌的群体中储存, 各个受体菌分别含有这种生物的不同的基因, 成为基因文库。如果基因文库中包含了一种生物所有的基因, 这种基因文库就叫做基因组文库; 如果只包含了一种生物的一部分基因, 这种基因文库叫做部分基因文库,如 cDNA 文库。 PCR 技术是聚合酶链式反应的缩写,利用 DNA 双链复制的原理,将基因的核苷酸序列不断地加以复制,使其数量呈指数方式增加。利用 PCR 技术获取目的基因的前提, 是要有一段已知目的基因的核苷酸序列,以便根据这一序列合成引物。扩增的过程是:目的基因 DNA 受热变性后解链为单链,引物与单链相应互补序列结合,然后在 DNA 聚合酶作用下进行延伸,如此重复循环多次。 2. 基因表达载体的构建(核心) ⑴目的:是目的基因在受体细胞中稳定存在,并且可以遗传至下一代,使目的基因能够表达和发挥作用⑵组成: 启动子+ 目的基因+ 终止子+ 标记基因启动子是一段有特殊结构的 DNA 片段,位于基因的首端,它是 RNA 聚合酶识别和结合的部位,有了它才能驱动基因转录出 mRNA ,最终获得所需要的蛋白质。终止子终止子相当于一盏红色信号灯, 使转录在所需要的地方停止下来。终止子位于基因的尾端,也是一段有特殊结构的 DNA 短片段。标记基因标记基因的作用是为了鉴别受体细胞中是否含有目的基因, 从而将含有目的基因的细胞筛选出来,如抗生素基因就可以作为这种基因。 3. 将目的基因导入受体细胞⑴将目的基因导入植物细胞①农杆菌转化法:使目的基因整合到受体细胞染色体 DNA 上②基因枪法③花粉管通道法⑵将目的基因导入动物细胞:显微注射法⑶将目的基因导入微生物细胞受体细胞↓ Ca2+ 感受态细胞↓含重组表达载体 DNA 分子的缓冲液感受态细胞吸收 DNA 分子 4. 目的基因的检测与鉴定:分子杂交技术检测转