实验三网织红细胞计数血沉测定.pptx

一、网织红细胞计数
目的 掌握网织红细胞（Ret)试管法计数的原理及操作方法。
原理 网织红细胞胞质内残存少量核蛋白体及核糖核酸等嗜碱性物质，经煌焦油蓝或新亚甲蓝等染液活体染色后，呈蓝色网状或点状结构，可与成熟红细胞相区别。
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器材 显微镜、试管、吸管、玻片、推片、香柏油、擦镜纸、擦镜液
试剂 新亚甲蓝
标本 新鲜全血
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操作步骤
将Ret染液2滴加至小试管中，做好标记。
在已加入染液的小试管内注入新鲜全血2滴，立即混匀。
室温下染色10-15min。
取染色血1小滴推制成薄血涂片，自然干燥
低倍镜下选择红细胞分布均匀、着色好、背景清晰的部位进行计数。
常规法：在油镜下计数至少1000个红细胞中的网织红细胞。
Ret百分数=（1000个RBC中的Ret数/1000）×100%
网织红细胞百分数：%
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血涂片制备
推片
载玻片
血液
将推片匀速向前，勿停顿。涂片的厚薄取决于速度和角度。
一张满意的血涂片应厚薄均匀
头 体 尾
涂片干燥后用铅笔在血涂片的头部写上姓名和编号
李四
B 1 2 3
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参考区间
成人、儿童：%-%
新 生 儿：%-%
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注意事项
推荐使用新亚甲蓝染液，试剂应定期配制，用前过滤。
染液与血液比以1:1为宜,染色时间不能过短。试剂用后及时盖好盖子，以免挥发。
应及时染色，及时测定。
选择红细胞分布均匀，网织红细胞着色好的、背景清晰的部位计数。应兼顾血片边缘和尾部。
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目的 掌握魏氏法测定血沉的原理及方法。
原理 将一定量的枸橼酸钠抗凝全血置于魏氏血沉管中，直立于血沉架上，由于红细胞比重大于血浆，克服血浆阻力而下沉，1h后读取上层血浆高度的毫米数，即为红细胞沉降率。
器材 魏氏管、血沉架、洗耳球。（血沉管）
试剂 109mmol/L枸橼酸钠溶液。
标本 外周血。
二、血液沉降率测定（魏氏法）
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109mmol/L枸橼酸钠溶液抗凝剂的采血管中（即采血量到采血管2ml刻度线处） ，混匀。
混匀血吸入血沉管内至刻度“0”处，拭去管外残余血。
将血沉管直立于血沉架上。
1h末准确读取红细胞下沉后露出的血浆高度。
XX mm/h
操作步骤
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参考值
＜50岁：男性 < 15mm/h
女性 <20mm/h

＞50岁：男性 < 20mm/h
女性 <30mm/h

＞85岁：男性 < 30mm/h
女性< 42mm/h

儿童: <10mm/h
二、血液沉降率测定（魏氏法）
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注意事项
，使抗凝剂与血液比例为1：4。
，不得倾斜。
，血沉架应避免直接光照、移动和振动。
～25℃，并要求在采血后 2h内完成。
，并不是均衡等速度的沉降，绝不可以只观察30min沉降率，将结果乘以2作为1h血沉结果。
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