猪瘟ELISA抗体检测试剂盒说明书.doc

猪瘟ELＩSＡ抗体检测试剂盒
ﻫﻫ猪瘟病毒ELISＡ抗体检测试剂盒ﻫ使用说明书
【简介】
试剂盒由抗原包被的微孔板，酶标羊抗猪IgＧ及其它试剂制成,应用间接ELISＡ原理检测猪血清中抗猪瘟病毒抗体。ﻫ【用途】ﻫ猪瘟ELＩSA诊断试剂盒用于检测猪血清中猪瘟病毒抗体。评估猪场猪瘟疫苗免疫状况,感染猪的血清学诊断。ﻫ【原理】ﻫ本试剂盒是采用猪瘟抗原包被微孔板,在试验中，加入稀释的对照血清和待检血清,经温育后，若样品中含有抗猪瘟病毒的特异性抗体，则将与检测板上抗原结合,经洗涤除去未结合的抗体和其他成分后；再加入酶标二抗，与检测板上抗原抗体复合物发生特异性结合;再经洗涤除去未结合的酶结合物,在孔中加TＭＢ底物液,与酶反应形成蓝色产物,加入HF溶液终止反应后,用酶标仪6３0nm波长测定各反应孔中的ＯD值。ﻫ【试剂盒主要成分】 ﻫ1 　包被抗原的微孔板                  　２块                   (９6孔／块)ﻫ2  阴、阳性对照血清                 各1管                  　()ﻫ３  羊抗猪酶标二抗                     1瓶                   (2０ml／瓶）ﻫ4  ２0倍浓缩洗涤液                    　1瓶                   (3０mｌ／瓶)ﻫ5  底物A液、B液                  　各1瓶                  　（１0ｍl/瓶)ﻫ6 　终止液                              １瓶                   （１０ml／瓶)ﻫ7  样品稀释液                          1瓶                  　（50ml/瓶)ﻫ８ 　血清稀释板                          ２块                  　(96孔／块)ﻫ９  说明书                              1张ﻫ【样品制备】ﻫ取动物全血，按常规方法制备血清,要求血清清亮，无溶血。
【洗涤液配制】ﻫ使用前，浓缩的洗涤液应恢复至室温（２5℃左右)，并摇动使沉淀的盐溶解(最好在3７℃水中加热５-１0mｉn）,然后用蒸馏水或去离子水作20倍稀释（例如：每板用２０ ml浓缩液加上3８0mｌ水），稀释好的洗涤液在4℃可以存放7天。ﻫ【样品稀释】ﻫ在血清稀释板中按1:４０的体积稀释待检血清（195μl样品稀释液中加５μl待检血清)。ﻫ注意:阳性对照和阴性对照1:４０稀释,(２3４μｌ样品稀释液中加６μｌ对照血清)。
【注意事项】ﻫ1
  试剂盒使用前各试剂应平衡至室温，使用后放回2-8℃。ﻫ2  不同批号试剂盒的试剂组分不得混用,使用试剂时应防止试剂污染。
3  不要用口移液。ﻫ4  ＴＭB（底物液B)不要暴露于强光,避免接触氧化剂。
5  检测板拆封后避免受潮或沾水(未用完的抗原包被板加干燥剂放于自封袋中，应尽快置于4℃)。ﻫ6 　待检血清样品数量较多时,应先使用血清稀释板稀释完所有要检测血清，再将稀释好的血清转移到检测板，