实验六 微生物大小及数量的测定.ppt

实验实验 6 6 酵母菌大小的测定酵母菌大小的测定一、实验目的和内容目的:学会测微尺的使用和计算方法及对单细胞微生物的测量。内容: 1. 学会并掌握测微尺的使用。 。二、实验材料和用具酿酒酵母菌悬液显微镜、目镜测微尺、镜台测微尺、擦镜纸。镜台测微尺目镜测微尺目镜测微尺每格实际代表的长度随物镜的放大倍数而改变,也会因使用不同的显微镜而产生误差,因此在使用前必须用镜台测微尺进行校正。目镜测微尺目镜测微尺的校正的校正三、操作步骤三、操作步骤 l l. .目镜测微尺的标定目镜测微尺的标定把目镜的上透镜旋开,将把目镜的上透镜旋开,将目镜测微尺目镜测微尺轻轻放在目镜的隔板上,使轻轻放在目镜的隔板上,使有刻度的一面朝有刻度的一面朝下下。将。将镜台测微尺镜台测微尺放在显微镜的载物台上,使放在显微镜的载物台上,使有刻度的有刻度的一面朝上一面朝上。先用低倍镜观察,调焦距,待看清镜台测微。先用低倍镜观察,调焦距,待看清镜台测微尺的刻度后,转动目镜,使目镜测微尺的刻度与镜台测尺的刻度后,转动目镜,使目镜测微尺的刻度与镜台测微尺的刻度相平行,并使两尺左边的一条线重合,向右微尺的刻度相平行,并使两尺左边的一条线重合,向右寻找另外一条两尺相重合的直线。寻找另外一条两尺相重合的直线。 2 : .标定公式: 计算两刻度间目镜测微尺的格数和镜台测微尺的格数计算两刻度间目镜测微尺的格数和镜台测微尺的格数。由于镜台测微尺的刻度每格长。由于镜台测微尺的刻度每格长 10 10μ μm m,所以可得: ,所以可得: 目镜测微尺每格长( 目镜测微尺每格长( μμm m) )= = 两条重合线间镜台测微尺的格数两条重合线间镜台测微尺的格数× ×10 10 两条重合线间目镜测微尺的格数两条重合线间目镜测微尺的格数三、操作步骤三、操作步骤 3 3. .菌体大小的测定菌体大小的测定将镜台测微尺取下,换上酿将镜台测微尺取下,换上酿酒酵母玻片标本,分别在低倍镜和高倍镜下找到目酒酵母玻片标本,分别在低倍镜和高倍镜下找到目的物,测量的物,测量 10 10~ ~20 20个菌体的长和宽占目镜测微尺的个菌体的长和宽占目镜测微尺的格数,再以目镜测微尺每格的长度计算出菌体的长格数,再以目镜测微尺每格的长度计算出菌体的长和宽。记录结果和宽。记录结果, ,求出平均值。求出平均值。镜台测微尺的玻片很薄,如需标定油镜头时镜台测微尺的玻片很薄,如需标定油镜头时,要格外注意,以免压碎镜台测微尺或损坏镜头。,要格外注意,以免压碎镜台测微尺或损坏镜头。思考题思考题为什么不同放大倍数的目镜和物镜必须分别进行标为什么不同放大倍数的目镜和物镜必须分别进行标定? 定? 酵母菌数量的测定一、目的要求 。 。二、基本原理用血球计数板在显微镜下直接计数是一种常用的微生物计数方法。该计数板是一块特制的载玻片,其上由四条槽构成三个平台;中间较宽的平台又被一短横槽隔成两半,各列有一个方格网,中间的大方格即为计数室。计数室的刻度一般有两种规格,一是大方格分成 25个中格,而每个中格又分成 16个小格;另一种是大格分成 16个中格,而每个中格又分成 25个小格, 每个大格中的小格都是 400 个。每一个大格边长为 lmm ,面积为 lmm 2,盖玻片与载玻片之间的高度为 ,故计数室的容积为 3。血球计数板血球计数板计数计数计数时,通常数五个中格的总菌数,然后求得每个中格的平均值,然后再换算成 lml 菌液中的总菌数。如果是 25个中方格的计数板, 1mL 菌液中的总菌数=A/5 ×25×10 4×B=50000A ·B( 个) A为五个中方格中的总菌数, B为菌液稀释倍数. 如果是 16个中方格的计数板, 1mL 菌液中的总菌数=A/5 ×16×10 4×B=32000A ·B( 个)