丁酸梭菌抑菌实验丁酸梭菌,又名酪酸梭菌,丁酸梭状芽孢杆菌,是一种专性厌氧的革兰氏阳性芽孢杆菌。丁酸梭菌代谢产物的突出特点就是丁酸、 B族维生素以及叶酸含量高。大量研究表明,丁酸梭菌具有极强的整肠作用,它能够通过抑制致病菌的生长繁殖从而调节肠道的微生态平衡,预防和治疗腹泻、肠炎等疾病。 1实验材料共培养用液体培养基;LB 培养基 2实验方法 丁酸梭菌对霍乱沙门氏菌的抑制作用①霍乱沙门氏菌种子培养:取平板活化好的菌种转接到 LB液体三角瓶中,装液量25mL/100 mL,37℃,150 r/min 培养 12-24h ,取培养菌液测活菌数和 pH值。②丁酸梭菌单独培养:取丁酸梭菌菌粉 g接种到装量为 25mL/30mL 的细菌培养瓶中,置于 37℃静止恒温培养 24h左右。(可按此比例扩大培养体积, g:25mL) ③丁酸梭菌和霍乱沙门氏菌混合培养:活化好的丁酸梭菌培养液 5mL接种到装液量为 20mL/30mL 的细菌培养瓶中,再把培养好的霍乱沙门氏菌菌液 1mL同时接入该共培养液中, 37℃恒温静止培养。对照组为向同样的共培养液体培养基中(装液量为20mL/30 mL) 接种霍乱沙门氏菌菌液 1mL,37℃恒温静止培养。分别在 16和24h 测pH值及沙门氏菌活菌数。④计数采用平板涂布法。选择 2~3个适宜梯度稀释液,吸取 100 μL涂布平板, 倒置于严格厌氧培养箱或严格厌氧培养袋中, 37℃培养 18~36h后计数。每个梯度做两个平行,每个平板的菌落数在 30~300 范围内有效。 丁酸梭菌对肠出血性大肠杆菌、魏氏梭菌的抑制作用实验方法同上,魏氏梭菌种子液为严格厌氧,应采用共培养液体培养基。 3实验结果 对霍乱沙门氏菌的抑制结果丁酸梭菌对霍乱沙门氏菌表现出非常强的抑制作用, 24h 活菌数从单独培养时 ×108CFU ·mL-1 减少到 ×103CFU ·mL-1 。 对肠出血性大肠杆菌的抑制结果混合培养 16h ,肠出血性大肠杆菌活菌数从单独培养时 ×108CFU ·mL-1 减少到7×106CFU ·mL-1 ,24h活菌数减少到 ×106CFU ·mL-1 , 下降至 , 呈现良好抑制作用。 对魏氏梭菌的抑制作用混合培养后,魏氏梭菌活菌数从单独培养时的 1×108 CFU ·mL-1 减少到
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