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(动物传染病学实验课件)7 实验七鸡的解剖，病料处理和接种.ppt

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(动物传染病学实验课件)7 实验七鸡的解剖，病料处理和接种
其它诊断方法
、RT-PCR、核酸探针（杂交）、基因芯片等分子生物学手段。
：饲料成份检查，钙、磷、氟、怀疑毒物分析。
：用分离到的病原是否能复制出与临床病例相同的症状？
主要诊断步骤包括病料的采集、保存和送检，病料涂片镜检，病原的分离与培养，对已分离病原体的毒力和生物学特性的鉴定等。
1. 病原学诊断
2. 血清学诊断
常用的血清学诊断方法包括血凝试验、血凝抑制试验、琼脂扩散试验、中和试验、补体结合试验、酶联免疫试验、免疫荧光抗体技术，以及免疫放射技术等。
可用已知的血清检验末知的病原、也可用已知的病原检验未知的血清，可根据需要和可能选择适当的方法进行检验（ELISA、HI和琼扩）。
3. 分子生物学诊断
分子生物学诊断技术是20世纪七、八十年代发展起来的诊断方法，具有特异性强、敏感性和快速等优点，例如PCR、RFLP、核酸探针技术和基因序列分析等。
可根据需要和条件选择合适的方法进行诊断。
实时荧光定量PCR
（Real-time PCR）
三、方法与步骤
细菌分离
无菌操作切取病变组织1-2g，涂于平皿的1/4
区，然后用接种针分区涂开，置37℃温箱培养。
病料处理（组织）
无菌操作取病变组织1-2g，用剪刀剪碎后移入匀
浆器，加入5ml生理盐水用匀浆器研磨均匀。取出
1ml研磨的悬液，，1000rpm
离心10min，取上清500µl（加入双抗1-5%）。

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