白细胞抗原检测.ppt

白细胞抗原检测
人类白细胞抗原(HLA)
HLA抗原分布相当广泛，见于所有的有核细胞上，但在淋巴细胞上的密度最高
血小板上的HLA抗原是血小板膜表面的固有结构成分，主要是HLA-I类的A、B位点的抗原
HLA-I类抗原是引起血小板同种免疫和血小板输注无效的主要抗原，约占80%
HLA抗原检测技术
人类白细胞抗原检测技术已广泛应用于器官移植前的组织配型
检测方法：血清学方法、细胞学方法和基因分型方法
与临床输血的关系—HLA抗原可引起免疫应答→HLA抗体→发热性非溶血性输血反应和血小板输注无效
HLA血清学方法
血清学方法：是用一系列已知的抗HLA抗原的标准血清来检测未知淋巴细胞表面的HLA抗原型别。
原理：淋巴细胞膜表面具有HLA抗原，而分型血清中含有抗特定HLA抗原的细胞毒抗体，该抗体与淋巴细胞膜上的相应的HLA抗原结合后在补体的参与下损伤细胞膜，经染料染色后，通过观察细胞是否被染色来判断待测细胞是否损伤或死亡，进而判断抗原、抗体反应的强度。
微量淋巴毒实验
微量淋巴细胞毒试验记分
死细胞（%）
记分
意义
0～10
1
阴性
11～20
2
可疑阴性反应
21～40
4
可疑阳性反应
41～80
6
阳性反应
0～＞80
8
强阳性反应
抗血清的来源和标准
①通过妊娠、输血和同种器官移植等免疫作用产生HLA同种抗体
②使用纯化的HLA抗原免疫动物，可产生HLA异种抗体
③使用杂交瘤技术，可获得单克隆抗体
④少数存在的天然抗体
质量标准
（FP《3%，FN《14%）
，采用强度指数SI表示，SI》70%
HLA细胞学方法
①纯合细胞分型方法
②预致敏淋巴细胞试验
③混合淋巴细胞培养
纯合细胞分型方法
该方法的原理为带有A/A纯合抗原的细胞（HTC）作为刺激细胞，带有未知抗原X/X的检测细胞作为应答细胞，在两种细胞组成的单向混合淋巴细胞培养反应（MLC）中，如果发生刺激反应，表明受检细胞能够识别A抗原当成外来抗原，所以受检细胞不具有A抗原，反之受检细胞可能是A抗原的 杂合子或纯合子