第二章 荧光光谱与荧光信号采集处理
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荧光(Fluorescence):
物质中的电子吸收光的能量由低能状态转变为高能状态,再回到低能状态时以光的形式释放出它所吸收的能量,这种光即称为荧光。
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光致发光:
利用光源激发而产生,荧光和磷光均为光致发光.
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共聚焦显微镜常涉及的光谱区域
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共聚焦显微镜常涉及的光谱区域
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激发光(EXCITATION):
能特异性地激发某种荧光的一定波长范围内的光线称为该荧光的激发光。
激发/吸收光谱;吸收波峰(最大吸收波长)
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激发光谱:
又称荧光激发光谱,通过测量荧光物质的荧光发射强度随激发波长变化而获得的光谱。
实质:
反映了不同波长激发光所激发出荧光的相对效率。
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发射光谱:
又称荧光发射光谱,反映荧光物质的荧光发射强度与发射光波长之间相互关系的光谱曲线。
受激光照射后所发出的荧光不是单一波长,而是由许多不同波长所组成的光谱曲线
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实质:
反映了所发射的荧光中各种波长组分的相对强度。
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二者关系: 物质发生电子从基态向激发态跃迁过程中吸收的能量,要高于荧光发射的能量,因此,荧光的波长要大于激发光的波长,两者的差值称为 Stokes shift(斯托克斯位移)。
激发和发射之间存在着能量损失
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