人基质金属蛋白酶-10(MMP-10)酶联免疫分析（ELISA ）.pdf

人基质金属蛋白酶-10(MMP-10)酶联免疫分析(ELISA)
试剂盒使用说明书
本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定人血清,细胞上清及
相关液体样本中基质金属蛋白酶-10(MMP-10)含量。
实验原理:
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人基质金属蛋白酶 10(MMP-10)水平。用纯化的
人基质金属蛋白酶 10(MMP-10)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依
次加入人基质金属蛋白酶 10(MMP-10),再与 HRP 标记的基质金属蛋白酶 10(MMP-10)
抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物 TMB 显色。 TMB 在
HRP 酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的
人基质金属蛋白酶 10(MMP-10)呈正相关。用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度(OD 值),
通过标准曲线计算样品中人基质金属蛋白酶 10(MMP-10)浓度。
试剂盒组成:
试剂盒组成 48 孔配置 96 孔配置保存
说明书 1 份 1 份
封板膜 2 片(48) 2 片(96)
密封袋 1 个 1 个
酶标包被板 1×48 1×96 2-8℃保存
标准品:900 μg/L ×1 瓶 ×1 瓶 2-8℃保存
标准品稀释液 ×1 瓶 ×1 瓶 2-8℃保存
酶标试剂 3 ml×1 瓶 6 ml×1 瓶 2-8℃保存
样品稀释液 3 ml×1 瓶 6 ml×1 瓶 2-8℃保存
显色剂 A 液 3 ml×1 瓶 6 ml×1 瓶 2-8℃保存
显色剂 B 液 3 ml×1 瓶 6 ml×1 瓶 2-8℃保存
终止液 3ml×1 瓶 6ml×1 瓶 2-8℃保存
浓缩洗涤液(20ml×20 倍)×1 瓶(20ml×30 倍)×1 瓶 2-8℃保存
样本处理及要求:
1. 血清:室温血液自然凝固 10-20 分钟,离心 20 分钟左右(2000-3000 转/分)。仔细收集上
清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
2. 血浆:应根据标本的要求选择 EDTA 或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合 10-20 分钟后,离心
20 分钟左右( 2000-3000 转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次
离心。
3. 尿液:用无菌管收集,离心 20 分钟左右( 2000-3000 转/分)。仔细收集上清,保存过程
中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。
4. 细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心 20 分钟左右(2000-3000 转/
分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用 PBS(-)稀释细胞悬液,细胞
浓度达到 100 万/ml 左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心 20 分
1
钟左右(2000-3000 转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
5. 组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的 PBS,。用液氮迅速冷冻保存备
用。标本融化后仍然保持 2-8℃的温度。加入一定量的 PBS(),用手工或匀浆