PDA培养基的配制方法计划.docx

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PDA培养基的配制方法
一、目的要求
1．学习并掌握配制培养基的一般方法和步骤。
2．学习并掌握棉塞的制作方法。
二、培养基的配制原理
培养基是人工配制的各种营养物质供微生物生长繁殖的基质，用以培养、分离、鉴定、
保存各种微生物或积累代谢产物。在自然界中，微生物种类繁多，营养类型多样，加上实训
和研究的目的不同，所以培养基的种类很多，但不论是何种培养基，均应含有水分、碳源、
氮源、能源、无机盐等。不同微生物对 pH值要求不一样，所以配制培养基时，还应根据不
同微生物对 pH值的要求，将培养基调到合适的 pH值范围。
三、实训材料和用具
琼脂，可溶性淀粉，葡萄糖， 10﹪NaOH，10﹪HCl，1mol／LNaOH，lmol／LHCl，KNO3，NaCl，
K2HPO4·3H20，MgSO4·7H20，FeSO4·7H2O；试管，三角瓶，烧杯，量筒，玻璃棒，天平，牛角匙， PH
试纸，棉花，牛皮纸，记号笔，纱布，
四、操作方法与步骤
(一)

培养基的配制
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PDA

培养基的配制

其配方如下：土豆

200g，葡萄糖

20g，琼脂

15～20g，水

1000mL，pH

值自然。
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(1)称量和熬煮

药品实际用量计算后，按培养基配方逐一称取去皮土豆。土豆切成小块放入锅中，加水
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1000ml，在加热器上加热至沸腾，维持

20－30min，用可用

2层纱布趁热在量杯上过滤，滤渣弃取。滤液补充
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水分到

1000ml。
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(2)加热溶解

把滤液放入锅中，加入葡萄糖

20g，琼脂

15～20g（提前搞碎），然后放在石棉网上，小
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火加热，并用玻棒不断搅拌，以防琼脂糊底或溢出，待琼脂完全溶解后，再补充水分至所需量。
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(3)分装

按实训要求，将配制的培养基分装入试管或

500ml

三角瓶内。分装时可用三角漏斗以免使培
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养基沾在管口或瓶口上造成污染。
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分装量：固体培养基约为试管高度的

1／5，灭菌后制成斜面，分装入三角瓶内以不超过其容积的一半为
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宜；半固体培养基以试管高度的

1／3

为宜，灭菌后垂直待凝。
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(4)加棉塞

培养基分装完毕后，在试管口或三角烧瓶口上塞上棉塞

(或泡沫塑料塞或试管帽等

)，以阻止
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外界微生物进入培养基内造成污染，并保证有良好的通气性能。
包扎加塞后，将全部试管用麻绳或橡皮筋捆好，再在棉塞外包一层牛皮纸，以防止灭菌