发酵罐操作规程.docx

发酵系统操作规程一、发酵前准备工作(1)检查电源是否正常,空压机、微机系统和循环水系统是否正常工作。(2)检查系统上的阀门、接头及紧固螺钉是否拧紧。(3)开动空压机, 压力,检查种子罐、发酵罐、过滤器、管路、阀门等密封性是否良好,有无泄漏。罐体夹套与罐内是否密封(换季时应重点检测),确保所有阀门处于关闭状态(电磁阀前方的阀门除外)。(4)检查水(冷却水)压、电压、气(汽)压能否正常供应。 ,允许在 - 范围变动,不能超过 ,温度应低于发酵温度 10℃;单相电源 AC220V ±10% ,频率 50Hz ,罐体可靠接地;输入蒸汽压力应维持在 ,进入系统后减压为 ; 空压机压力值 ,空气进入压力应控制在 - (空气初级过滤器的压力值)。(5)温度、溶氧电极、 PH电极校正及标定,详见触摸屏 PH、DO的标定帮助。(6)检查各电机能否正常运转(共 4个)。电磁阀能否正常吸合(整套系统共 11个电磁阀)。二、灭菌 1. 发酵系统安装好后的初次清洗罐内的清洗:酸碱罐、补料罐、种子罐可将罐体上方的法兰卸开,由操作工采用洁净布手动清洗,结束后排尽罐内的污水,在多冲洗几遍即可。发酵罐的清洗可采用自来水管通过手孔向罐体内壁冲洗,当水位上升到搅拌轴的第二片叶轮时停止冲洗,开动电机搅拌清洗。各管路的清洗,可以先采用清水冲洗,再根据相应功能采用相应的清洗介质(清洗管路时应以保护管路中的各种元件为前提),具体步骤可参考“空气管路的灭菌”。如果发酵系统长时间不用或培养的菌体与上一批次的不相同时,可采用 2%NaOH 清洗,其他各罐也可以采用发酵罐的清洗方式清洗,清洗结束后应对发酵系统灭菌。 2. 空气管路的灭菌(1)空气管路上的除菌过滤器,使用蒸汽通过减压阀(空气减压阀不能进行蒸汽灭菌,所以空气预过滤器不灭菌)、蒸汽过滤器然后进入除菌过滤器。(2)空气除菌过滤器的滤芯不能承受高温高压,因此, ,不得超过 。(3)空消过程中,除菌过滤器下端的排气阀应微微开启,排除冷凝水。(4)空消时间应持续 30分钟左右,当设备初次使用或长期不用后启动时, 最好采用间歇空消,即第一次空消后,隔3~5小时再空消一次,以便消除芽孢。(5)经空消后的过滤器,应通气吹干,约20~30分钟,然后将气路阀门关闭。保持空气管道正压。 3. 发酵罐空消(种子罐、补料罐、酸碱罐空消作为参考依据) (1)发酵罐空消前,应将打开排污阀 Q22 打开(使夹套内的压力不超压)。(2)关闭 Q14 ,微开 Q15, 打开蒸汽阀门 Q12 ,打开 Q13 向罐内通蒸汽;打开Q18 、Q19 通过取样口向罐内通蒸汽。(3)将罐上的接种口,排气阀 Q9,及排污管路上的阀门 Q24 、Q25 微微打开,使蒸汽通过这些阀门排出,当湿度达到 122 0C后开始计时,调整阀门 Q9、Q13 、Q19 的开度,保持罐内温度 122 0C~128 0C(压为一般在 ~ ),可根据工艺调整空消的温度与压力。(4)当时间达到 30~40分钟后,关闭 Q13 、Q15 、Q19 ,然后再关闭 Q12 、 Q18 ,打开空气管路上的阀门 Q14 、Q13 向罐内通空气冷却,让罐内保持正压在 - 之间。(5)需要快速冷却时则关闭夹套排污阀门 Q22 ,打开冷却水阀门 Q27/DC 1 向夹套通水冷却,到达常温后关闭冷却水。特殊情况下,可采用间歇空消(隔 3~5小时再空消一次,以便消除芽孢)。(6)空消时,溶氧、 PH电极取出,妥善保存,以延长其使用寿命。 4. 发酵罐实消(种子罐、补料罐、酸碱罐实消作为参考依据) 实消是当罐内加入培养基后,用蒸汽对培养基进行灭菌的过程。(1)空消结束后,关闭进气阀门 Q13, 打开 Q9卸去罐内压力,将校正好的 PH、DO电极装好,尽快将配好的培养基从加料口加入罐内。(2)培养基在进罐之前,应先糊化,一般培养基的配方量应根据工艺要求确定,发酵液的最终容积为罐体全容积的 70%左右计算(泡沫多的培养基为 60%左右,泡沫少的培养基可达 75~80%),考虑到冷凝水和接种量因素,以及是否流加,初定容由生产根据工艺的要求自行决定, 需在实践中摸索。(3)开启机械搅拌装置,低速转动,使罐内物料均匀混合。(4)打开夹套排污阀 Q22 、蒸汽阀 Q21 ,对罐内培养基预热(采用夹套通汽预加热)。当罐内温度升到 90℃时(具体温度应按蒸汽质量而变动), 关闭夹套进汽阀 Q21 ,关闭 Q14 ,全打开进汽阀 Q12, 打开 Q13 通入蒸汽,全开 Q18 ,微开 Q19