透析袋使用方法.doc

透析袋使用方法.doc透析袋的使用方法
透析袋的使用方法
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透析袋的使用方法
透析袋的使用方法
透析袋在使用前如何处理
透析已成为生物化学实验室最简便最常用的分离纯化技术之一。 在生物大分子的制备过程中，除盐、除少量有机溶剂、除去生物小分子杂质和
浓缩样品等都要用到透析的技术。
透析只需要使用专用的半透膜即可完成。 通常是将半透膜制成袋状， 将生物大分子样品溶液置入袋内， 将此透析袋浸入水或缓冲液中， 样品溶液中的大分子量的生物大分子被截留在袋内， 而盐和小分子物质不断扩散透析到袋外， 直到袋内外两边的浓度达到平衡为止。 保留在透析袋内未透析出的样品溶液称为 “保留液 ”，袋（膜）外的溶液称为 “渗出液 ” 或“透析液 ”。
透析的动力是扩散压， 扩散压是由横跨膜两边的浓度梯度形成的。 透析的速度反比于膜的厚度， 正比于欲透析的小分子溶质在膜内外两边的浓度梯度，还正比于膜的面积和温度，通常是 4℃透析，升高温度可加快透析速度。
透析膜可用动物膜和玻璃纸等， 但用的最多的还是用纤维素（再生纤维
素 RC、纤维素酯 CE、PVDF 等）制成的透析膜，目前常用的是美国美国光谱医学公司（ spectrum ，上海欧韦达仪器科技有限公司是中华区
特约总经销）和美国 Union Carbide （联合碳化物公司，上海欧韦达仪器科技有限公司是华东区特约经销商） 生产的各种尺寸的透析管， 截留分子量 MwCO （即留在透析袋内的生物大分子的最小分子量，缩写
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为 MwCO ）大概有 100 、500 、1000 、2000 、3500 、8000 、10000 、
15000 、20000 、25000 、50000 、100000、250000 、500000、
1000000 等种类，单位为道尔顿（D）。
商品透析袋制成管状， 其扁平宽度为 8 mm ～77 mm 不等。为防干裂，出厂时都用 10 ％的甘油处理过，并含有极微量的硫化物、重金属和一
些具有紫外吸收的杂质， 它们对蛋白质和其它生物活性物质有害， 用前必须除去。
透析膜可用动物膜和玻璃纸等， 但用的最多的还是用纤维素制成的透析膜，目前常用的是美国 Union Carbide （联合碳化物公司）和美国光谱医学公司生产的各种尺寸的透析管，截留分子量 MwCO （即留在透析袋内的生物大分子的最小分子量）通常为 1 万左右。
截留分子量越大也就是说透过性越大， 一般而言，透析袋截留分子量越小价格越贵，因为截留的分子越小要求透析袋越密，价格越贵。
透析袋使用前处理：
把透析袋剪成适当长度（ 10-20cm ）的小段。
2. 在大体积的 2%(W/V)碳酸氢钠和1mmol/L EDTA(pH )中
将透析袋煮沸10 分钟。
用蒸馏水彻底清洗透析袋。
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4. 放在

1mmol/L EDTA(pH )

中将之煮沸

10 分钟。 前处理也可
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以将透析袋放在广口瓶中充满水，

松动瓶盖，于

20psi （)
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高压灭菌

10min

，代替第四步用

1mmol/LEDTA(PH=8)

中煮沸
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10min

的操作。
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冷却后，存放于 4 度，必须确保透析袋始终浸没在溶液内。若长时间不用，可加少量叠氮钠 NaN2 ，以防长菌。从此时起取用透析袋是必须戴手套。
用前在透析袋内装满水然后排出，将之清洗干净。洗净凉干的透析袋弯折时易裂口，用时必须仔细检查，不漏时方可重复使用。
这样做可以保证透析袋有良好的透析效果。
，则可用沸水煮五至十分钟，再用蒸
馏水洗净，即可使用。
：透析袋不推荐反复使用，如果要反复使用就是用
之前怎么处理的，用后也怎么处理。
。即使是可再生的也请
使用于同种蛋白，避免交叉污染。
10. 短时间内再次使用的话，可用去离子水洗净后，浸泡于20% 乙醇
溶液中，使用时务必将乙醇洗净。
使用后的透析袋保存方法： .用生理盐水浸泡以去掉蛋白，并用