水质检测微生物指标.ppt

水质检测微生物指标
微生物指标
菌落总数
总大肠菌群
耐热大肠菌群
一、菌落总数
——平皿计数法
:
菌落总数(standard plate-count bacteria)水样在营养琼脂上有氧条件下37℃培养48h后,所得1mL水样所含细菌的总数。
厌氧或微需氧菌、有特殊营养要求的以及非嗜中温的细菌,由于现有条件不能满足其生理需求,故难以繁殖生长。因此菌落总数并不表示实际中的所有细菌总数,菌落总数并不能区分其中细菌的种类,所以有时被称为杂菌数,需氧菌数等。
:营养琼脂
:培养箱36 ℃+1 ℃等
生活饮用水
1mL水样+15mL45℃左右琼脂摇匀,做平行样和空白对照。冷却后,翻转平板,36 ℃+1 ℃培养48h后计数。
水源水
先制成1:10,1:100等稀释液,再按生活饮用水的检验步骤进行检验。
注意事项
(1)操作要快而准,包括材料、加样、倒培养基。
(2)吸液体时液体不能进入吸头。
(3)样品稀释时一定要混匀。
(4)倒培养基前,瓶口要过火焰。
(5)一定要有空白对照。
(6)培养基温度控制,培养基薄厚。
作平皿菌落计数时,可用眼睛直接观察,必要时用放大镜检查,以防遗漏。在记下各平皿的菌落数后,应求出同稀释度的平均菌落数,供下一步计算时应用。在求同稀释度的平均数时,若其中一个平皿有较大片状菌落生长时,则不宜采用,而应以无片状菌落生长的平皿作为该稀释度的平均菌落数。若片状菌落不到平皿的一半,而其余一半中菌落数分布又很均匀,则可将此平皿计数后乘2以代表全皿菌落数。然后再求该稀释度的平均菌落数。
①首选30~300之间进行计算,若只有一个稀释度的平均菌落数符合此范围时,则将该菌落数乘以稀释倍数报告之(见表1实例1)。
②若有两个稀释度,其生长的菌落数均在30~300之间,则视二者之比值来决定,若其比值小于2应报告两者的平均数(见表1实例2),若大于或等于2则报告其中稀释度较小的菌落数(见表1实例3、4)。
③若所有稀释度的平均菌落数均大于300,则应按稀释度最高的平均菌落数乘以稀释倍数报告之(见表1实例5)。
④若所有稀释度的平均菌落数均小于30,则应按稀释度最低的平均菌落数乘以稀释倍数报告之(见表1实例6)。
⑤若所有稀释度的平均菌落数均不在30~300之间,则应以最接近30或300的平均菌落数乘以稀释倍数报告之(见表1实例7)。
⑥若所以稀释度的平板上均无菌落生长,则以未检出报告之。
⑦如果所以平板上都菌落密布,不要用“多不可计”报告,而应在稀释度最大的平板上,任意数其中2个平板1cm22,再乘其稀释倍数作报告。
⑧菌落计数的报告:菌落数在100以内时按实有数报告,大于100时,采用两位有效数字,在两位有效数字后面的数值,以四舍五入方法计算,为了缩短数字后面的零数也可用10的指数来表示。
表1 稀释度选择及菌落总数报告方式
实例
不同稀释度的平均菌落数
两个稀释度菌落数之比
菌落总数/(CFU/mL)
报告方式
/(CFU/mL)
10-1
10-2
10-3
1
1365
164
20
——
16400
×104
2
2760
295
46

37750
×104
3
2890
271
60

27100
×104
4
150
30
8
2
1500
×103
5
多不可计
1650
513
——
513000
×105
6
27
11
5
——
270
×102
7
多不可计
305
12
——
30500
×104
二、总大肠菌群
——多管发酵法(另有滤膜法和酶底物法)

总大肠菌群(total coliforms)指一群在37℃培养24h能发酵乳糖、产酸产气、需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性无芽孢杆菌。
:乳糖蛋白胨培养液、伊红美兰培养基和革兰氏染液。
:培养箱、平皿和试管等。