实验十五琥珀酸脱氢酶活性的测定 Activity Determination of inate Dehydrogenase 一、实验原理?以脱氢方式使物质氧化的酶,称脱氢酶。琥珀酸脱氢酶(inate dehydrogenase) 是三羧酸循环中的一个酶,能促使琥珀酸脱氢成为反丁烯二酸,并将脱下的氢传递给受氢体。用甲烯兰作受氢体,结果甲烯兰被氢还原生成无色的甲烯白。 COOH HC CH2 CH2 COOH + MB HOOC CH + MB ·2H 琥珀酸反丁烯二酸 COOH ??在无氧环境下,琥珀酸脱氢酶的活性与甲烯兰脱色的速度成正比,使定量甲烯兰脱色所需时间的倒数,可以用来表示酶的活性。本实验用液态石蜡制造无氧环境,这样可以不用真空设备或氮气。二、实验用品? 1 、材料?新鲜肌肉糜? 2 、试剂?(1)% 甲烯兰溶液; ?(2) 琥珀酸溶液?(3)液态石蜡; ? 3 、仪器设备?试管及试管架、恒温水浴锅、 1毫升及 2毫升的吸量管、烧杯。三、方法和步骤?取2支试管,各加 琥珀酸溶液 毫升,% 甲烯兰溶液 1毫升和液态石蜡溶液 2毫升。再分别加入 克肌肉糜和煮过的肌肉糜分别混匀后,将试管放入 37℃水浴中保温,随时观察并记录甲烯兰脱色过程和时间,酶活力=1/ 时间。四、实验结果? 37 ℃水浴中保温随时观察并记录甲烯兰脱色过程和时?间,酶活力=1/ 时间五、思考题?? ?? ??
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