医疗药品管理版药典微生物限度检查法操作要点.pdf

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（医疗药品管理）版药典微
生物限度检查法操作要点 : .
05版药典微生物限度检查法操作要点
林丽英
05版药典微生物限度检查法和以往药典的最大不同就是多了方法验证。由
于以前版本的药典没有要求对检验方法进行必要的验证，所以大家均觉得不好理
解、不好难操作。为了更好执行 05版药典，现根据我的理解，对药典上的各种
检验方法于验证时的操作要点和大家作个探讨。
壹、验证的目的
由于制剂于投料和加工过程中，或有抑菌成份存于，或由于各种成份相互作
用的结果，将可能对某些类型的微生物的检出产生影响。对所建立的微生物限度
检查法进行验证的目的，就是要对每个样品使用适宜的检验方法，顺利的检出样
品中污染的各种类型的菌。
细菌计数验证所用的菌株：
大肠埃希菌[CMCC（B）44102]：代表革兰阴性菌；
金黄色葡萄球菌[CMCC（B）26003]：代表革兰阳性球菌；
枯草芽孢杆菌[CMCC（B）63501]：代表革兰阳性杆菌；
霉菌计数验证所用的菌株：
白色念珠菌[CMCC（F）98001]：代表酵母菌；
黑曲霉[CMCC（F）98003：代表霉菌；
由于每个菌株代表不同类型的菌，所以只有这五个菌株的回收率均达到要求，
才表明样品中污染的各种类型的菌均可能检出来，否则，所得的结果是不能真实
地反映样品的污染情况的。 : .
接种大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌的新鲜培养物至菌液的制备：
营养肉汤培养基或营养琼脂培养基中，培养 18～24小时；接种白色念珠菌的新
鲜培养物至改良马丁培养基或改良马丁琼脂培养基中，培养 24～48小时。上述
的菌悬液。％无菌氯化钠溶液制成每1ml50～l00cfu含菌数为
黑曲霉的新鲜培养物至改良马丁琼脂斜面培养基中，培养5~73~，加入
％无菌氯化钠溶液，将孢子洗脱。然后，吸出胞子悬液(用管口带有薄的无菌棉
花或纱布能过滤菌丝的无菌毛细吸管)至无菌试管内，％无菌氯化钠溶液制
成每lml50～l00cfu含孢子数的孢子悬液。
二、方法的验证
所有验证方法的操作均应于阳性接种间。