乙肝疫苗生产发展简介.pptx

疫苗的 生产1，灭活死疫苗
患者---分离出致病微生物（细菌或者病毒）-----通过培养细菌（培养基）或者病毒（细胞），获得大量的致病微生物---用甲醛灭活（杀死）致病微生物---纯化---铝吸附-----灭活死疫苗。
第1页/共53母乙肝疫苗
深圳康泰生物制品公司
重组酿酒酵母乙肝疫苗
华北药厂和长春生物制品研究所等
重组CHO细胞乙肝疫苗
大连高新(汉信）公司 和华兰生物疫苗公司
重组汉逊酵母乙肝疫苗
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国内乙肝疫苗生产厂家工艺比较
厂家
种菌
发酵
细胞破碎
粗纯
精纯
吸附
北京深圳
啤酒
酵母
四级
发酵
高压
破碎
硅胶吸附
疏水
层析
原位吸附
大连
汉信
汉逊
酵母
四级
流加
球磨
破碎
PEG
硅胶吸附
DEAE
分子筛
区带
普通吸附
华兰
生物
汉逊
酵母
四级
流加
高压破碎
硫酸铵沉淀
疏水
DEAE
分子筛
普通吸附
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公司
菌种的表达水平
纯化的 收率
北京
深圳
50mg/L
20%
大连
汉信
150-200mg/L
15%
华兰
生物
200-300mg/L
20%
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新乡华兰，大连汉信，北京天坛
华兰：菌种好，表达水平高，纯化收率高，所以，总体而言，华兰公司的技术更为先进。
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北京生物制品研究所(天坛生物)生产的乙肝疫苗的基本情况：
生产技术：从美国MERCK公司引进。
年产量：1000万人份，3000万支。
生产设备：从美国购进。
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基本技术资料：
菌种：重组酿酒酵母
表达水平：50mg/L
表达效率：1,35%(表面抗原蛋白/酵母总蛋白）
纯化收率：20%
发酵罐工作体积：500L
一次发酵所得抗原量：50mg/Lх500L=25g
纯化后所得抗原量25gх20%=5g
可生产疫苗量5,000,000/5=1,000,000支
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北京天坛的 弱项和不足：表达水平低，抗原数量少，每剂疫苗只含5微克或10微克的抗原，比华兰疫苗抗原含量少一倍，所以抗体滴度低和抗体持续时间较短。
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北京天坛和新乡华兰表达 水平和抗原产量的比较
表达水平
抗原产量
北京天坛
50微克
低
新乡华兰
300微克
高
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北京天坛和新乡华兰疫苗抗原含量和抗体反应的比较
每剂疫苗
抗原含量
抗体滴度
抗体持续时间
北京天坛
5微克（儿童）
10微克（成人）
低
短
华兰公司
10微克（儿童）
20微克（成人）
高
长
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大连汉信和新乡华兰纯化步骤和纯化收率的比较
纯化步骤
纯化收率
大连汉信
多
低于20%
新乡华兰
少
高于20%
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汉逊酵母和啤酒酵母的比较
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重组汉逊酵母的特点 （甲基营养型酵母）
甲基营养型酵母：以甲醇为唯一能源和炭源的酵母。
1,多个HBsAg基因拷贝被整合到染色体中，遗传稳定性好。
2,发酵过程中不产生乙醇，黏度小，可实现高密度培养。
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3,高效表达HBsAg 400-1000mg/L。4,发酵过程中均使用化学合成培养基，不使用酵母粉等营养成分，生产成本低。 5，生物安全性好，汉逊酵母是存在于土壤，水中的一种酵母种群。它不含人和动物的病原体，不产生内毒素。按照国外基因技术法规，汉逊酵母被列为基因操作生物安全性1组。与酿酒酵母属同一生物安全等级。国外生物安全委员会还将汉逊酵母选为典型的工业菌株的研究模型。
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重组汉逊酵母乙肝疫苗生产工艺
菌 种
小 三 角 瓶

大 三 角 瓶

种 子 发 酵 罐
生 产 发 酵 罐

细 胞 破 碎
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去除细胞碎片

疏水层析

离子交换层析