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生化技术知识整理
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当试样由载气携带进入色谱柱与固定相接触时，被固定相溶解或吸附
随着载气的不断通入，被溶解或吸附的组分又从固定相中挥发或脱附
挥发或脱附下的组分随着载气向前移动时又再次被固定相溶解或液在常温下不一定为液体，但在使用温度下一定呈液体状态。
固定液的种类繁多，选择余地大，应用范围不断扩大。
担体：化学惰性的多孔性固体颗粒，具有较大的比表面积。
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担体（硅藻土）
红色担体：
孔径较小，表孔密集，比表面积较大，机械强度好。适宜分离非极性或弱极性组分的试样。
缺点: 是表面存有活性吸附中心点
白色担体：
煅烧前原料中加入了少量助溶剂(碳酸钠)。颗 粒疏松，孔径较大。表面积较小，机械强度 较差。但吸附性显著减小，适宜分离极性组分的试样。
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C 固定液分类方法
如按化学结构、极性、应用等的分类方法。
在各种色谱手册中，一般将固定液按有机化合物的分类方法分为：脂肪烃、芳烃、醇、酯、聚酯、胺、聚硅氧烷等.
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D、固定液的选择
按极性相似原则选择：固定液与被测组分极性“相似相溶”，K大，选择性好
（1）分离非极性组分——选非极性固定液， 按沸点顺序出柱，低沸点的先出柱，沸点高后出柱。
（2）分离极性组分——选极性固定液，按极性顺序出柱，极性小的先流出色谱柱，极性强的后出柱。
（3）分离非极性和极性的混合组分——选极性固定液，按极性顺序出柱，非极性组分的先流出色谱柱，极性组分的后出柱。
（4）对于能形成氢键的试样，应选用极性或氢键型固定液，此时各组分按形成氢键的能力大小顺序分离。不易形成氢键的先流出，最易形成氢键的最后流出。
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E. 固定液配比（涂渍量）的选择
配比：固定液在担体上的涂渍量，一般指的是固定液与担体的百分比，配比通常在5%～25%之间。
配比越低，担体上形成的液膜越薄，传质阻力越小，柱效越高，分析速度也越快。
配比较低时，固定相的负载量低，允许的进样量较小。分析工作中通常倾向于使用较低的配比。
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柱长和柱内径的选择
增加柱长对提高分离度有利（分离度R正比于柱长L2），但组分的保留时间tr ↑ ，且柱阻力↑，不便操作。
柱长的选用原则是在能满足分离目的的前提下，尽可能选用较短的柱，有利于缩短分析时间。
填充色谱柱的柱长通常为1~3米，内径3~4厘米。
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柱温的确定
(1) 首先应使柱温控制在固定液的最高使用温度（超过该温度固定液易流失）和最低使用温度（低于此温度固定液以固体形式存在）范围之内。
(2) 柱温升高，分离度下降，色谱峰变窄变高。柱温↓，分离度↑，分析时间↑.
(3)柱温一般选择在接近或略低于组分平均沸点时的温度。
(4)组分复杂，沸程宽的试样，采用程序升温。
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载气种类和流速的选择
1) 载气种类的选择
(1)载气摩尔质量大，可抑制试样的纵向扩散，提高柱效。
(2)载气流速较大时，传质阻力项起主要作用，采用较小摩尔质量的载气（如H2，He），可减小传质阻力，提高柱效。
(3)热导检测器需要使用热导系数较大的氢气有利于提高检测灵敏度。在氢焰检测器中，氮气仍是首选目标。
(4)在载气选择时，还应综合考虑载气的安全性、经济性及来源是否广泛等因素。
2)载气流量以30~80ml/min较为合适.
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其它操作条件的选择
1）进样方式和进样量的选择
液体试样采用色谱微量进样器进样，规格有1μL，5μL，10μL等。
进样量应控制在柱容量允许范围及检测器线性检测范围之内。进样要求动作快、时间短。
气体试样应采气体进样阀进样。
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2）气化温度的选择
色谱仪进样口下端有一气化器，液体试样进样后，在此瞬间气化;
气化温度一般较柱温高30~70℃
防止气化温度太高造成试样分解。
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6、气相色谱检测装置
浓度型检测器：
测量的是载气中通过检测器组分浓度瞬间的变化，检测 信号值与组分的浓度成正比。如热导池检测器、电子捕获检测器等。
质量型检测器：
测量的是载气中某组分进入检测器的速度变化，即检测信号值与单位时间内进入检测器组分的质量成正比。如氢火焰离子化检测器、火焰光度检测器等。
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检测器的性能指标
一个优良的