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安捷伦1260高效液相操作规程
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安捷伦液相1260高效液相色谱
操作规程
前期工作
查找资料〔最好是外文文献〕了解别人做该样品时常用的流动相和固定相。如果力视数稳定，翻开检测器灯，观察基线情况。
注：假设反复几次检测器显示错误，右击“视图〞中的“工作日志〞“当前工作日志〞查看是什么错误。
以上步骤用文字也可描述为
翻开计算机，登陆windows操作系统。
翻开主机各模块电源〔从上至下〕，待各模块完成自检后，再双击桌面“仪器1联机〞图标,进入化学工作站，从“视图〞菜单中选择“方法和运行控制〞画面。
把各流动相放入溶剂瓶中。
旋开排气阀〔逆时针〕，右单击“四元泵〞图标出现快捷键，点击“方法〞选项进入泵编辑画面。将泵流量设到5ml/min，溶剂A设到100%，翻开泵，排出管线中的气体2—3分钟，直到管线内由溶剂瓶到泵入口无气泡为止,查看柱前压力〔假设大于10bar，
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那么应更换排气阀内过滤白头〕。
依此切换到B、C、D溶剂分别排气。
，多元泵那么再设定溶剂配比，如A=80%，B=20%；关闭排气阀〔顺时针〕。
，2分钟后将泵的流量设到1ml/min，冲洗色谱柱20—30分钟。
把缓冲液换成流动相，待柱前压力根本稳定后,翻开检测器灯，观察基线情况。
编辑样品信息：由“运行控制〞进入“样品信息〞，设定操作者姓名，样品数据文件名等。
四元泵参数设置：
色谱柱设置〔TCC检测器参数设置〕
右击TCC模块中的空白区域，在“温度〞左侧下面的方框内输入所需的温度，并选中它，右侧选中“与左侧相同〞——使柱温箱的温度左右一致。
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VWD检测器参数设定
右键点击 VWD 模块视图空白处，选择“方法〞进入 VWD 的参数设置界面
波长---设置 VWD 检测波长
峰宽---设置为色谱图中的预期的最窄峰。峰检测器将忽略比峰宽设置
窄很多或者宽很多的所有峰
停止时间---设置 VWD 停止分析时间。一般设置为“与泵一致〞即可
杂项---当 VWD 与其他检测器一起工作或者设定冲洗色谱柱的梯度方法时，关闭检测器的灯，分析将停止。如果希望关闭检测器的灯时也能进行分析，将“采集所需的等已翻开〞一栏不选定即可。
时间表---此处可以变化的参数包括自动平衡、改变波长、执行扫描。
进样
在设置“运行控制->样品信息〞后，将手动进样阀扳至“load〞状态进样(将样品装入到定量环内)。进样后，将手动进样器扳至“inject〞状态，工作站自动开始记录采集数据。
分析完成后，将手动进样阀扳至“load〞状态，用定量环的 5 倍体积左右的甲醇清洗定量环，再在“inject〞状态下清洗排空管路。清洗进样口，防止残留样品污染下次进样。
注：手不要拿注射器的针头和有样品的部位，不要有气泡，吸样时要慢、快速排出再慢吸，反复几次，10µµL，有气泡也看不到，多吸1-2µL把注射器针尖朝上，气泡上走到顶端，再推动针杆排除气泡，进样的速度要快，每次进样要保持相同的速度。
在线信号检测
“视图〞中翻开在线信号，可以随时了解样品出峰情况。
关机
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关闭检测器的灯：G1314B/C/E/F(可变波长紫外检测器)，关闭检
测器的灯后冲洗系统，可以延长检测器灯的寿命。
冲洗系统：没有盐缓冲溶液的流动相，(反相系统)用 85%~90%有机相+15%~10%水相冲洗系统和反相色谱柱或者适宜的流动相冲洗系统和反相色谱柱。有盐缓冲溶液的流动相，(反相系统)用 85%~90%水相+15%~10%有机相冲洗系统和反相色谱柱(反相系统)，除去反相色谱柱与系统中的盐溶液。然后用85%~90%有机相 +15%~10%水相冲洗系统和反相色谱柱。
封存色谱柱：(反相系统)用 90%~95%有机相+10%~5%水相封存反相色谱柱，两端封死。〔如长时间存放可将柱子完全侵泡有机相内，以防用纯有机相封存反相色谱柱，如果长期保存有机相会挥发〕。
关闭电脑：将泵流速逐步降至 0ml/min，单击“关闭〞按钮关闭所有模块，退出化学工作站，关闭电脑。
本卷须知
使用反向柱时，要注意正相溶液的比例最好不要超过5%，否那么会对柱子产生影响。
氘灯是易耗品，应最后开灯，不分析样品时即关灯，洗柱子时应关灯。
操作中常见问题的解决方法
①宽峰：系统未到达平衡；溶解样品的溶剂极性比流动相差不多；
色谱