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1 a L. sp). Through orthogonal ex
periment, a highly efficient system of transient exp ression was observed in p lant intact leaves when they were
treated with 200 μmol/L acetosyringone, 0 8 OD600 bacterium density, vacuum 30 m in and co culture 6
days. Transgenic exp ression level of the op timal condition is imp roved 16 3 times than that of the control.
Key words: L actuca sativa; A grobacterium tum efaciens; Vacuum infiltration; GUS; Transient exp ression
1 目的、材料与方法
植物瞬时表达系统 , 是不同于稳定遗传转化的有效转化方法。它在启动子分析、基因功能分析和
〔 〕
生产重组蛋白方面有着更为广泛的用途 1 。瞬时表达体系具有较多的优点。1. 简单快速 : 转化基因
可在转化的一周内进行分析 , 避免了繁杂的组织培养过程 ; 2. 表达水平高 : 当单链的 T DNA 进入植
物细胞后 , 许多未整合到植物基因组中的游离外源基因同样可以表达 。3. 安全有效 : 瞬时表达中的
基因转移及其表达是一个独立的过程 , 不受植物生长发育过程的影响 , 不产生可遗传的后代 , 试验结
果更为直观可靠 , 且不存在基因漂移的生态风险。因此人们对此开展了大量的研究 , 但多集中在基因
枪的转化方面 , 而利用农杆菌真空渗透法进行瞬时表达直到 1997年才被人们发现和重视〔2〕, 由于它
的简便高效性使其在植物研究中迅速推广。2005年 Tadeusz等利用该方法对拟南芥 、烟草、莴苣进行
研究发现 , 莴苣的瞬时表达水平最高 , 且表达水平
莴苣高效瞬时表达体系的建立 来自淘豆网m.daumloan.com转载请标明出处.
