白细胞计数实验报告.doc

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白细胞计数和分类
目的：掌握血涂片制备的操作要领、瑞氏染色方法、正常外周血五种白细胞形态特点、
原理：各种白细胞必须经过染色,才易于区分其类别。常用者为瑞氏〔W.
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白细胞计数和分类
目的：掌握血涂片制备的操作要领、瑞氏染色方法、正常外周血五种白细胞形态特点、
原理：各种白细胞必须经过染色,才易于区分其类别。常用者为瑞氏〔Wright’s染色法和姬姆萨<Giemsa>染色法。测定外周血液中各种白细胞的相对比值,以观察其数量、形态和质量变化,通过显微镜观察染色血涂片,计算血液中各类白细胞的百分率,称为白细胞分类计数。利用白细胞总数和各类白细胞的百分率,即可计算每mm3血液中各类白细胞的绝对值。
实验器材：香柏油、盖玻片、推片、采血针或注射器、小滴管、消毒棉球、瑞氏染液、~、蒸馏水、计数板及专用盖片、针 1ml刻度移液管、1ml EP管、光学显微镜。20ul刻度移液管、推片
实验步骤
白细胞分类
1．血片制作：
取一滴血,滴于洁净无油脂的玻片一端。左手持玻片,右手再取边缘光滑的另一玻片作为推片。将推片边缘置于血滴前方,然后向后拉,当与血滴接触后,血即均匀附在二玻片之间。此后以二玻片约呈30—45度的角度平稳地向前推至玻片另一端。推时角度要一致,用力应均匀,即推出均匀的血膜〔血膜不可过厚、过薄。将制好的血涂片晾干,不可加热。
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注：〔1良好涂片标准：
１> 呈头、体、尾舌形
２> 血膜厚薄适宜
３> 两边留有空隙
〔2涂片好坏与下列因素有关：
1血滴大小
2推片与玻片之间角度
3推片速度
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2、血涂片的染色步骤：
〔1用蜡笔在血膜两端各划一道线,以免染料外溢,置涂片于染色架上。
〔2滴加瑞氏染液,共计七八滴数,以盖满血膜为度,静置1分钟。
〔3再滴加等量的磷酸缓冲盐溶液,轻轻摇动,并轻吹液体使染色液与缓冲液混合均匀,静置15分钟。
〔4用清水冲洗。切勿先倾去染液再冲洗,否则沉淀物附于血膜上不宜出去。冲洗后斜置血涂片于空气中干燥。或先用滤纸吸取水分迅速干燥,即可镜检。
3、白细胞分类计数：先用低倍镜检查涂片及染色是否均匀。然后加一滴香柏油于血膜厚薄均匀处〔一般在体尾交界处,在油镜下由此处开始按其形态特征进行分类计数,计数移动时避免重复。根据所见到的100个白细胞,记录各种白细胞所占的百分数。
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4、各类白细胞的形态特征
嗜中性白粒细胞：圆形,胞浆淡红色,胞浆内有多量紫红色细小颗粒〔染色不佳时则看不清楚。核为蓝紫色。
嗜酸性白细胞：大小、形态与中性白细胞大体相似,唯胞浆内含有粗大的鲜红色颗粒。核多数为两叶。
嗜碱性白细胞：大小、形态与中性白细胞大体相似,但胞浆内含有粗大的深蓝色,常遮盖在核上。核分叶不明显
淋巴细胞：分大小两种,小淋巴细胞圆形,核染成深紫色,圆形或肾形,胞浆很少,常呈一小片月牙状,染成蓝色。大淋巴细胞,核圆形或肾形,胞浆相对较多,染成天蓝色,在胞浆与核之间有淡染带。有时内含少数紫红色大颗粒。
单核细胞： 核染成紫色,其染色质疏松,核形不规则。胞浆较多,染成