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一种复配型玛咖保健品对小鼠免疫功能的影响(1)..doc


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一种复配型玛咖保健品对小鼠免疫功能的影响(1)
    
】 目的 探讨一种添加了西洋参总皂苷的玛咖保健品对小鼠细胞免疫功能、体液免疫功能、巨噬细胞吞噬功能以及NK细胞活性的影响。方法 实验组小鼠每日分别灌胃高、中、低剂量的复配玛咖根干抗疲劳和免疫调节具有密切联系[6],添加合适比例的具有增强免疫力作用的天然植物提取物将可能使玛咖保健品具有抗疲劳和增强免疫力双重作用。我们将药食两用植物西洋参(Panax quinquefolium L.)的功效成分——西洋参总皂苷按照合适的比例添加到玛咖根干粉中,以此为原料制备成一种复配型玛咖保健食品。本文就是通过实验对该产品在小鼠细胞免疫功能、体液免疫功能、巨噬细胞吞噬功能以及NK细胞活性等方面的影响进行考察,从而评价其在增强免疫力方面的功效。
    
    1 材料与方法
    
     材料 玛咖根干粉是由秘鲁利马AGRO NATURALES ;西洋参总皂苷粉是由中国广东省深圳思味特科技有限公司于2004年10月提供,含西洋参总皂苷≥80%。玛咖根干粉和西洋参总皂苷粉按照重量比93:7进行均匀混合,制备成复配型玛咖根干粉。常温保存,供实验用。
    
     实验动物及受试方式 实验动物选用BALB/C清洁级雌性小鼠120只,体重18~22g,均由湖北省实验动物中心提供。将小鼠随机均分为8组,其中4组为免疫Ⅰ组,进行ConA诱导的小鼠淋巴细胞转化实验、NK细胞活性测定;另4组为免疫Ⅱ组,进行小鼠半数溶血值(HC50)测定、小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验。
    
    参考国内外玛咖根干粉和西洋参总皂苷的食用量, g/kg BW, BW BW。因此免疫Ⅰ组和Ⅱ组各自的4组小鼠分别对应高、中、低3个剂量组和对照组。样品用蒸馏水配置,对照组以蒸馏水代替受试物。每日灌胃1次,每次20ml/kg BW,连续30天后测定各项指标。
    
    
实验方法
    
ConA诱导的小鼠淋巴细胞转化实验[7] 小鼠颈椎脱臼处死后,无菌取脾,置于盛有适量无菌Hank’s液的小平皿中,制成细胞悬液。用Hank’s液洗3次,每次1000rpm离心(德国CHRiST冷冻离心机)10min。然后将细胞悬浮于2ml的完全培养液中,计数活细胞数,调整细胞浓度为2×106个/ml。将细胞悬液分2孔加入24孔培养板中,每孔1ml,在其中1孔加50μl ConA液(相当于5μg/ml),另1孔作为对照,置5% CF-autoflow型CO2细胞培养箱(美国NuAir Inc.)中,37℃培养72h。培养结束前4h,, 1640培养液,同时加入MTT(5 mg/ml)50μl/孔,继续培养4h。培养结束后,每孔加入1ml酸性异丙醇,吹打均匀,使紫色结晶完全溶解。然后分装到酶标微孔板中,每孔做3个平行孔,用∑960型全自动酶标仪(美国Metertech Inc.),以570nm波长测定光密度值。淋巴细胞的增值能力用加ConA孔的光

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