细菌的噬菌体.ppt

细菌的噬菌体
一、一般性状
侵染细菌的病毒称为细菌的噬菌体，简称噬菌体。
噬菌体由核酸和蛋白质外壳构成。
噬菌体有丝状的、球状的，但大多数为蝌蚪状的。
蝌蚪状噬菌体
噬菌体的侵染
噬菌体接触到对它敏感的细菌时，它以
细菌的噬菌体
一、一般性状
侵染细菌的病毒称为细菌的噬菌体，简称噬菌体。
噬菌体由核酸和蛋白质外壳构成。
噬菌体有丝状的、球状的，但大多数为蝌蚪状的。
蝌蚪状噬菌体
噬菌体的侵染
噬菌体接触到对它敏感的细菌时，它以尾部末端吸附细菌，其中DNA通过尾部注入到细菌细胞内，蛋白质外壳还留在细菌体外。注入细菌细胞内的DNA，控制和改变了细菌的代谢活动，并在其中复制噬菌体的DNA和蛋白质外壳，然后组成新的噬菌体。细菌就全部消解并释放新噬菌体。
噬菌体的侵染
噬菌体的侵染
噬菌斑
培养的细菌被侵染后就会发生明显变化，原来混浊的细菌悬浮液就会变清；在琼脂平板上的细菌就会出现无菌的透明斑，称为“噬菌斑”。
噬菌体都有一定的寄生范围，有的寄生范围广，可以侵染一个属中不同种的细菌。甚至不同属的细菌称为多价噬菌体；有的寄生范围窄，仅能侵染同一种细菌，甚至种内的一个菌系，称为单价噬菌体。
前者在研究细菌亲缘关系有作用；后者在细菌的鉴定上应用。
噬菌体的侵染范围
二、研究方法
噬菌体的分离
噬菌体的纯化
噬菌体的繁殖
噬菌体的保存
3、噬菌体的繁殖
纯化的噬菌体，繁殖后可用于性状的测定和保存。
一般用三角瓶液体振荡培养寄主细菌，培养24～48小时后，接种一小块噬菌斑，再继续培养一段时间，待混浊的细菌悬浮液变清后，用细菌滤器过滤，除去残留的细菌，即为噬菌体悬浮液。
4、噬菌体效价测定
噬菌体的效价是指噬菌体的浓度，或者每毫升含噬菌体的数量。
效价测定：将样本按1：10的比例稀释6～8次，在灭菌培养皿中加入不同倍数的稀释液，再加入浓细菌液和45℃的培养基，培养12小时，检查噬菌斑的多少（一个噬菌斑被认为是由一个噬菌体繁殖起来的）。
噬菌斑
5、细菌的鉴定
噬菌体用于鉴定之前，必须测定其寄主范围，测定时使用寄主和地理来源相近的菌株。
单价噬菌体：只能侵染原来用于分离的寄主细菌，这类噬菌体就只能用于这类细菌的鉴定、分布等方面研究。
多价噬菌体：能侵染多种细菌，往往用几个多价噬菌体组合，研究不同细菌间的亲缘关系。
鉴定方法(1)、噬菌体样本多时的测定方法
噬菌体样本较多时使用此方法。
在平板上先用涂抹棒接上目标细菌（横向涂抹），细菌生长24小时后，再纵向涂抹不同的噬菌体样本。
一个平板上可测定几个噬菌体样本，培养后观察划线部位是否出现噬菌现象。
划线测定
(2)细菌亲缘关系测定
培养皿中加1ml待测定的噬菌体悬浮液，再加入45℃肉汁胨培养基，混匀。待琼脂平板凝固后，用灭菌的移植环蘸不同的细菌悬浮液在平板上划线。培养后观察测定的细菌能否生长。
6、噬菌体的保存
%蛋白胨液或肉汁胨培养液培养细菌，繁殖噬菌体悬浮液，过滤灭菌后保存。
方法1：将噬菌体悬浮液装入灭菌安瓶中，封口，4℃保存，可保存几个月或几年。
方法2：试管中先加入氯仿，再在其上面加噬菌体悬浮液，比例为1：1～20。
不能用冷冻干燥方法保存，因可降低噬菌体存活率。
三、噬菌体的应用
植物病原细菌的鉴定：
两个噬菌体系统：
丁香假单孢菌 Pseudomonas syringae
油菜黄单孢菌 Xanthomonas camastris
植物病害流行上的应用：
植物病害防治：
感谢各位来宾的倾听