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细胞生物的学实验报告材料.docx


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细胞生物学实验报告
细胞生物学实验报告
小鼠睾丸染色体的制备与观察
姓名:杜旭 学号: 201100230155 系年级: 2011 级临七一班 同组者:赵伟 日期: 2012/5/16
【实验目的】
依据有以下几个参数 : ① 相对长度 (relative length): 指单个染色体的长度与包括 X 染色体在内的单倍
体染色体总长度之比, 相对长度 =单条染色体的长度 /( 单倍体常染色体 +X 染色体 ) 的总长度× 100%。 ②臂指
数 (arm index): 指染色体长臂与短臂的比率, 臂指数 =长臂 / 短臂。 ③ 着丝粒指数 (centromere index): 指
短臂占整个染色体长度的比率,着丝粒指数 =短臂 / 整个染色体长度× 100%, 该比率决定了着丝粒在染色体
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细胞生物学实验报告
中的相对位置。④染色体的臂数 : 对于端部着丝粒染色体,臂数为 1,其它为 2。根据 Levan(1964) 所制定
的人类染色体标准,臂指数在 ~ 之间的染色体为中央着丝粒染色体,在 ~ 之间为亚中央着丝
粒染色体, 在 ~ 间为亚端部着丝粒染色体, 大于 为端部着丝粒染色体; 着丝粒指数在 ~
之间的染色体为中央着丝粒染色体,在 ~ 之间为亚中央着丝粒染色体,在 ~ 之间为亚端
部着丝粒染色体,小于 为端部着丝粒染色体。
⒋ 原理分析
通过获取小鼠睾丸细胞(分裂能力强) ,本实验采用这一材料,通过前处理,低渗,固定,制片,染
色等步骤制得染色体标本,可观察到许多处于分裂中期的染色体,可以进行染色体组型分析。一般观察有
丝分裂中期,染色体的形态最典型、最易辨认和区分。因此,制备染色体标本获取的是中期细胞。
【实验用品】
⒈材料
小白鼠
⒉试剂
秋水仙素、 % KCl 低渗液、 固定液(甲醇:冰醋酸 =3: 1)、 Giemsa 染液、 % 生理盐水、 柠
檬酸钠溶液
⒊仪器
注射器、针头、解剖盘、解剖剪、 镊子、玻璃吸管、 10ml 刻度的离心管、离心机、 载玻片、 盖玻
片、 显微镜、擦镜纸、 铜网
【实验步骤】
●预处理→取睾丸→剪碎→离心→低渗→离心→固定→离心→固定→滴片→染色→观察
⒈预处理: 取雄性小鼠按每克体重注射 4ug,给小白鼠注射秋水仙素, 经 14-16h 后,断头法杀死小鼠,
去除睾丸用生理盐水( %的 NaCl)洗去血污;
⒉放入装有 1ml %KCl 液的小烧杯中剪碎(呈乳白色) ;
⒊用铜网过滤到刻度离心管中,再加 %KCl 液至 4ml ;
37℃静置 30min,进行低渗处理;⒌离心: 800-1000r/min 离心 8min , 弃上清
⒍加入 2ml 甲醇冰醋酸固定液( 3:1 ),并用吸管吹气,轻轻打散细胞,固定 8min;
⒎再以 800-1000r/min 离心 8min;

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  • 时间2022-04-27