培养基母液配制
培养基配制通常先根据各组分性质,配制成较浓的母液(母液浓度为培养基 浓度的若干倍如50或100倍),贮存在冰箱中备用,以后配制培养基时根据用 量量取。由于培养基成分较多,如果每配制一次即进行多次称量(不少成分用量 较微), 6H2O ,因此在配制中分微量I、n配制。按照表 2,表3配 方,用电光天平称量,其它同大量元素。配制培养基时,每配制1L培养基,取微量I 10ml , 微量 n 。
表2 MS培养基微量I的配制
化合物名称
培加基浓良(mg/L)
扩大100倍称量(mg)
1
MnSO4 4H2O
2230
2
ZnSO4 7H20
860
3
H3BO3
620
4
KI
83
5
Na2MoO 4 2H2(
25
表3 MS培养基微量n的配制
在舁 丁 p
化合物名称
培养基浓度
(mg/L)
扩大10000倍称量 (mg)
1
CuSO4 5H2O
250
2
CoCl2 - 6H2O
250
汪思:
使用电子 分析天平 时注意不要把药品撒到称盘上,用完以后,用吸耳球将天平内的脏物清理
干净。
3、铁盐母液的配制
铁盐不是都需要单独配成母液,如柠檬酸铁,只需和大量元素一起配成母液即可。目前常用
的铁盐是硫酸亚铁和乙二胺四乙酸二钠的螯合物,必须单独配成母液。 这种螯合物使用起来
方便,又比较稳定,不易发生沉淀。配制方法同上,直接用蒸储水加热搅拌溶解,定容至
1L。配制培养基时,配制 1L取此液10ml。
表4 MS铁盐母液的配制
在舁 丁 P
化合物名称
培加基浓良(mg/L)
扩大100倍称量(mg)
1
Na2-EDTA
3730
2
FeSO4 7H2O
2780
汪思:
在配制铁盐时,如果加热搅拌时间过短,会造成 FeS04和Na2-EDTA鳌合不彻底,此时若
将其冷藏,FeSO4会结晶析出。为避免此现象发生,配制铁盐母液时,FeSO4和Na2-EDTA
应分别加热溶解后混合,并置于加热搅拌器上不断搅拌至溶液呈金黄色 (约加热20 - 30
min),调pH值至5 .5,室温放置冷却后,再冷藏。
4、有机母液的配制
MS培养基的有机成分有甘氨酸、肌醇、烟酸、盐酸硫胺素和盐酸毗哆素。培养基中的有机
成分原则上应分别单独配制。配制直接用蒸储水溶解,定容至 1L,注意称量时用电子 分析
天平。配制培养基时,每配 1L培养基取此液5ml。
注息:
由于维生素母液营养丰富, 因此贮藏时极易染菌。被菌类污染的维生素母液, 有效浓度降低, 并且易给后期培养造成伤害,不宜再用。避免此现象发生的方法是 :配制母液时用无菌重蒸 储水溶解维生素,并贮存在棕色无菌瓶中,或缩短贮藏时间。
表5 MS培养基有机物质母液的制备
在舁 丁 P
化合物名称
土方加基浓良(mg/L)
扩大200倍称量(mg)
1
甘氨酸
2
400
2
肌醇
100
20000
3
盐酸硫胺素 (VB1)
100
4
盐酸叱哆素 (VB6)
100
5
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