Agilent 1100型高效液相色谱仪操作规程.ppt

Agilent 1100型高效液相色谱仪操作规程
仪器各组件
泵 ：四元泵、二元泵
在线脱气器
进样器：自动进样器及手动进样器
柱温箱
检测器： DAD检测器、UV检测器
Agilent1100在线脱气机
Agilent 1100型高效液相色谱仪操作规程
仪器各组件
泵 ：四元泵、二元泵
在线脱气器
进样器：自动进样器及手动进样器
柱温箱
检测器： DAD检测器、UV检测器
Agilent1100在线脱气机
Agilent1100在线脱气机工作原理
何时需要使用Agilent在线脱气机
如果在低UV波长段，用最高灵敏度进行检测
如果要求使用最佳进样精度
如果要求保留时间重现性很高
（）
如果样品和检测对流动相中溶解氧敏感
Agilent 1100泵
Agilent 1100四元泵工作原理
Agilent 1100泵头结构
Agilent 1100自动进样器结构
排气
将流动相放入溶剂瓶中，打开Purge 阀，依次单击【Pump】→【Set up Pump】，设Flow为2ml/min，单击OK ，再依次单击【Pump】→【control】，选中on，单击OK，则系统开始Purge至管路无气泡为止，切换管路反复操作至所需管路均无气泡。
在【control】选项中选off，关闭泵，关闭Purge 阀。单击泵下面瓶图标，输入溶剂的实际体积和瓶体积。如图所示。
打开10％异丙醇溶液控制阀，用针筒抽吸至管路中有液体流出。调节控制阀松紧，控制流量至流出量约为每分钟5～15滴。
编辑分析方法
新方法建立：点击【Method】，点击【Edit entire method】或【New method】选项，进行方法编缉。
在Method Comments 中加入方法的信息如方法的用途等
泵参数设定
在Flow 处输入流量, 在Solvent A、B、C、D 处输入比例，也可Insert一行”Timetable” ,编辑梯度，在Pressure Limits Max 处输入柱子的最大耐高压。单击Ok进入下一画面
自动进样器参数设定
选择合适的进样方式
进样体积
洗瓶位置
进样方式：“Standard Injection”只能输入进样体积“Injection with Needle Wash”可以输入进样体积和洗瓶位置此方式针从样品瓶抽完样品后会在洗瓶中洗针
Use injector program ---可以点击Edit 键进行进样程序编辑
点击Ok进入下一画面
柱温箱参数设定
在”Temperature”下面的方框内输入所需温度,并选中它,点击”more>>”键,选中“Same as left”使柱温箱的温度左右一致
点击ok进入下一画面
检测器参数设定－UV
在”Wavelength”下方的空白处输入所需的检测波长,如254nm, 在“Peakwidth (Response time)”下方点击下拉式三角框,选择合适的响应时间, 如>(2s)
在Timetable 中可以Insert 一行输入随时间切换的波长
点击ok进入下一画面
检测器参数设定－DAD
样品波长--一般选择最大吸收处的波长
样品带宽BW—一般选择最大吸收值一半处的整个宽度
参比波长—一般选择在靠近样品信号的无吸收或低吸收区域
参比带宽BW—至少要与样品信号的带宽相等许多情况下用100nm作为缺省值
Peak width Response time 其值尽可能接近要测的窄峰峰宽
选中所用的灯点击Ok进入下一画面
方法保存
单击Method 菜单选中Save method as 输入一方法名，如test
单击Ok
编辑分析方法
选择已有方法：点击【Method】，点击【Load method】选项，选取已存的各种操作方法。
样品分析与采集数据
将样品放于样品盘中相应位置，所有的样品均需澄清。
待仪器显示Ready，基线平稳，从【Run control】菜单中选择【Run Method】，开始进样分析。
数据处理：单击【View】菜单，单击【Data analysis】选项，进行数据分析。单击【View】菜单，单击【Method and Run control】选项，回到样品分析界面。
数据分析方法编辑
从File 菜单选择Load signal 选中您的数据文件名
单击Ok
积分
从Integration 中选择“Auto