HPLC法测定呋塞米片含量.doc

HPLC法测定吠塞米片含量
【摘要】目的 建立HPLC法测定味塞米片的含量。方法采 用 HPLC 法。以 phenomenex C18 5u 250 X4. 6mm 为色谱柱； 流动相：甲醇-水-0. 01mol/L磷酸盐缓冲液(60： HPLC法测定吠塞米片含量
【摘要】目的 建立HPLC法测定味塞米片的含量。方法采 用 HPLC 法。以 phenomenex C18 5u 250 X4. 6mm 为色谱柱； 流动相：甲醇-水-0. 01mol/L磷酸盐缓冲液(60： 35： 5)； 流速：1. Oml/min；检测波长：286nmo结果 吠塞米在3T4ug 范围内线性关系良好，线性回归方程Y=56217X-10762 (r=0. 9995)；回收率平均值为 %, RSD 为 0. 93% (n=9)o 结论该法操作简便，准确，可靠，适用于味塞米片的质量 研究。
【关键词】HPLC法；味塞米片；含量
吠塞米片主要成分为味塞米，功能主治是水肿性疾病高 血压，预防急性肾功能衰竭，用于各种原因导致肾脏血流灌 注不足，高钾血症及高钙血症，稀释性低钠血症，抗利尿激 素分泌过多症(SIADH),急性药物毒物中毒等。现行《中国 药典》采用的是紫外分光光度法，专属性不强，本文采用HPLC 法测定味塞米片的含量，现报道如下。
1仪器与试药
岛津LC-20AT型高效液相色谱仪，岛津SPD-20A紫外检 测器，岛津SIL-20A自动进样器，CT0-10AS色谱工作站。
JAC-300超声波清洗机。
味塞米对照品(中国药品生物制品检定所)，味塞米片
(市售品)，甲醇为色谱纯，其他为分析纯，水为超纯水。
2方法与结果
2. 1色谱条件与系统适应性实验色谱柱phenomenex C18 5u 250X4. 6mm；流动相：甲醇-水-0. 01mol/L磷酸盐缓 冲液(60： 35： 5)；流速：1. Oml/min；检测波长：286nm； 进样量：20ul；柱温：30°Co理论板数按味塞米计算不低于 2000o
精密称取味塞米对照品100. 15mg,置 100ml的量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，制成Img/ml 对照品贮备液。精密量取1ml,置100ml的量瓶中，加流动 相稀释至刻度，摇匀，即得对照品溶液。精密称取供试品(相 当于味塞米20mg),置100ml的量瓶中，加流动相适量，超 声10分钟，加流动相稀释至刻度，滤过，精密量取续滤液 5ml,置100ml的量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，用 0. 45 um微孔滤膜过滤，即得供试品溶液。
2. 3方法学考察 线性关系的考察：精密量取贮备液 0. 3, 0. 5, 0. 7, , 1, 2, ,分别置 100ml 量瓶中，
加流动相稀释至刻度，制成标准曲线系列溶液。按上述色谱 条件，各进样20ul,以进样浓度为横坐标(X),峰面积为纵 坐标(Y),得回归方程为：Y=56217X-10762 (r=0. 9995)结 果表明，咳塞米在3-14ug范围内线性关系良好。
精密度实验：精密量取对照品溶液，重复进样5次，记
录峰面积，结果RSD为0. 66% （n=5）o
稳定性实验：取供试品溶液（批号2012 0311）分别于 0, 2, 4,