血糖及糖化血红蛋白的检测及干扰研究进展.doc

血糖及糖化血红蛋白的检测及干扰研究进展
摘要:2010年美国糖尿病协会将糖化血红蛋白(HbA1c)检测作为筛选和诊断糖尿病指标,其参考界值为HbA1c≥%。至此,HbA1c同血糖一样正式成为糖尿病诊断检测指标。血糖及Hb对协助临床诊疗、降低患者损伤显得尤为重要。
1检验方法
临床检测系统分为中心实验室(central laboratory,CL)和即时检测系统(point-of-care testing,POCT)。血糖的测定包含空腹血糖和随机血糖测定,依据临床需求的改变,可选取不同检测系统进行血糖监测。酶法是中心实验室主要的监测方法,该法的特异度和敏感度均较高,主要包括己糖激酶(hexokinase,HK)法、葡萄糖氧化酶(Glucose oxidase,GOD)法和葡萄糖脱氢酶(Glucose dehydrogenase,GDH)法。POCT多使用电化学方法测定血葡萄糖含量,目前临床使用的血糖仪的检测技术均采用生物酶法,主要有GOD和GDH两种,而GDH 还需联用不同辅酶,分别为吡咯喹啉醌葡萄糖脱氢酶(Pyrroquinolinquinone glucose dehydrogenase,PQQ-GDH)、黄素腺嘌呤二核苷酸葡萄糖脱氢酶(flavin adenine dinucleotideglucose dehydrogenase,FAD-GDH)及烟酰胺腺嘌呤二核苷酸葡萄糖脱氢酶(Nicotinamide adenine dinucleotide glucose dehydrogenase,NAD-GDH)三种。但其各有缺陷,临床使用需结合患者情况选用不同的血糖仪,如GDH血糖仪易受糖类物质干扰,而GOD 血糖仪对葡萄糖特异性较高,但易受氧分压的干扰[7]。 GHb是指由血红蛋白(Hb)和葡萄糖通过非酶作用形成的一种Hb产物,健康人Hb可分为HbA(成人Hb 97%)、HbA2(%)和HbF(胎儿Hb %)三类。大多数HbA未被糖化(大约94%),大约6%的HbA中1条或2条β-链氨基酸末端与葡萄糖形成的稳定、不可逆的四聚体化合物(N-1-脱氧果糖基-Hb),可被归类为HbA1c[8]。临床实验室常用的HbA1c分析方法分为两大类:一类基于所带电荷不同,包括阳离子交换层析法、电泳法和高效液相色普法(High Performance Liquid Chromatography,HPLC)等;另一类基于GHb基团结构不同,包括亲和层析法和免疫法等。其中HPLC法又可细分为离子交换-高效液相色谱法(Ion Exchange-High Performance Liquid Chromatography,IE-HPLC)和亲和层析-高效液相色谱(Affinity chromatography-High Performance Liquid Chromatography,AC-HPLC),前者被認为是HbA1c检测的国际标准化方法[9]。AC-HPLC系统工作原理是葡萄糖和血红蛋白稳定结合后都会产生顺位二醇官能团,后者能与硼酸盐特异性结合,进而分离测定HbA1c。IE-HPLC系统工作原理是利用HbA1c与其他Hb电荷的不同分离HbA1c。
2干扰血糖及HbA1c测定的因素

在临床中,同一检验项目常存在不同的检验方法,不同检验方法之间的对比也有助于临床对检验错误及干扰的发现。血糖常用方法有HK法、氧化酶偶联比色(GOD-POD)法、氧化酶电极法(GOD-OR),其中GOD-OR法属于床边快速检测系统,方便快捷。张力等[10]、周竞[11]等研究表明,血必净可对己糖激酶法有负干扰,多巴胺、复方丹参、维生素C(VitC)对GOD-POD法存在负干扰而对GOD-OR法无干扰。但国外学者研究表明[12,13],VitC在烧伤患者中大量使用可对GOD-OR法产生正干扰,影响血糖检测准确性,造成低血糖的发生。因此,掌握药物对不同检验方法产生的干扰,对于解决临床误诊误治及医疗纠纷有极大的帮助。
血糖本身易受多种因素影响发生变化,如检验前标本处理延时、血细胞比容改变等均可影响血糖测量[14]。研究发现[15],血液标本离体后能否及时处理亦可影响血葡萄糖的浓度,血糖会以每小时7%的速率进行降解,即使加入氟化钠抑制葡萄糖酵解酶实现糖酵解抑制,也需要2 h才能开始起效,而分离提取后无溶血的血清,血糖可在25℃以下稳定保存8 h,当温度达4℃以下时,可保存72 h。血液粘度的增加可减缓血液中不同组分的扩散,可降低安培传感器中的电流[16]。溶血会使细胞内容物释放,导致Hb浓度增高,Hb在主波长