鸦胆子苦醇通过Nrf2 H...制胃癌细胞HGC-27增殖 高薇.pdf

中国实验方剂学杂志
Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae
ISSN 1005-990 （海军军医大学 长海医院药学部，上海 200433）
[摘要] 目的 研究鸦胆子苦醇对人胃癌 HGC-27 细胞增殖的影响及其作用机制。方法 细胞计数试剂盒
（CCK-8）检测不同浓度鸦胆子苦醇对 HGC-27 细胞的存活率；鸦胆子苦醇（、15、30 μmol ·L-1）作用于
HGC-27 细胞 24 h，分析细胞克隆形成情况；活性氧荧光探针（DCFH-DA）检测细胞内活性氧水平，脂质过
氧化荧光探针（C11-BODIPY）检测细胞内脂质过氧化水平，实时多聚核苷酸链式反应（Real-time PCR）和
蛋白免疫印迹法（Western blot）分别检测溶质载体家族 7 成员 11（SLC7A11）、谷胱甘肽过氧化物酶 4（GPX4）、
溶质载体家族 40 成员 1（SLC40A1）、转铁蛋白（Transferrin）、核因子红细胞 2 相关因子 2（Nrf2）、血红素
加氧酶-1（HO-1）的信使核糖体（mRNA）水平和蛋白表达情况。结果 与空白组比较，随鸦胆子苦醇药物浓
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度增大，HGC-27 细胞存活率逐渐降低，其半数抑制浓度（IC50）为 μmol ·L ；与空白组比较，鸦胆子
苦醇（、15、30 μmol ·L-1）组细胞克隆形成明显减少(P<)，呈现剂量依赖性；鸦胆子苦醇（、15、
30μmol ·L-1）组细胞内活性氧（ROS），脂质过氧化水平明显增多(P<)，细胞内铁离子浓度显著升高(P<)，
细胞乳酸脱氢酶（LDH）泄漏显著增多(P<)，呈现剂量依赖性；鸦胆子苦醇（、15、30 μmol ·L-1）组
铁死亡相关 SLC7A11、GPX4、SLC40A1 的 mRNA 水平明显降低和蛋白表达显著减少，transferrin 的 mRNA
水平明显升高和蛋白表达显著增多(P<)，且呈剂量依赖性；鸦胆子苦醇（、15、30 μmol ·L-1）组 Nrf2
和 HO-1 的 mRNA 水平和蛋白表达显著降低，且呈剂量依赖性(P<