沙棘粉对衰老模型小鼠脑组织MDA和GSH含量的影响及其抗疲劳效果的研究.doc

1 沙棘粉对衰老模型小鼠脑组织 MD A 和 GS H 含量的影响及其抗疲劳效果的研究作者: 陈轶玉, 乔慧, 陆培培, 黄成【摘要】采用昆明小鼠为实验对象, 通过饲喂不同比例的沙棘粉饲料 4 周以后, 在抗疲劳实验中, 以血清乳酸脱氢酶(LDH) 活力、血乳酸(BLA) 、肌糖原(MG) 、肝糖原(LG) 等4 个生理参数为指标观察沙棘粉的抗疲劳效应,结果表明,饲喂4 周沙棘粉剂的小鼠,其 LDH 、 LG 含量均显著高于对照组; 其抗疲劳时间亦显著增长, 且抗疲劳实验 30min 和 60mi n 后的血乳酸水平均低于对照组。在检测小鼠脑组织的 MD A 和 GS H 含量时发现4 %~ 6 %剂量沙棘粉能降低 MD A 含量, 提高 GSH 含量,表明沙棘粉能拮抗 D- 半乳糖的损伤,达到维生素相同效果。【关键词】沙棘粉;衰老小鼠;脑组织氧化还原物质; 抗疲劳效果沙棘制品不仅可以作为饵料中的维生素源, 还可制成供人类食用的产品。沙棘果享有“维生素仓库”和“神秘果”之称, 2 沙棘果中含有丰富的生物活性物质, 具有祛痰、利肺、养胃、健脾等功效,对心血管系统、免疫系统、抗肿瘤、抗衰老、抗炎、抗辐射损伤等方面均有显著的药理效应[1]。可以预见, 沙棘制品的市场前景十分可观,而目前我国沙棘资源浪费严重。因此开发利用此资源已迫在眉睫。西部地区政府及种植户迫切希望高等学校、科研院所开展沙棘资源开发利用的研究, 本实验采用沙棘果的干粉作为实验材料, 通过饲喂昆明鼠 4 周以后, 进行其抗疲劳效果的研究, 为沙棘资源开发利用提供基础性实验参数。 1 材料与方法 动物来源及实验场所实验动物选自南京安立默实验动物繁殖调剂中心(许可证号 SYXK 2002-0059 ), 在分组前选用了出生日龄( 4 周龄)及体重都基本相同的昆明小鼠(雄性) ;实验场所为南京大学药业有限公司动物房(许可证号 SCXK2002-0016 )。 实验分组取小白鼠 147 只, 随机分成 7 个大组, 每组均为 21 只,组 1 作为饲喂添加复合维生素的对照组,组 2 作为饲喂无复合维生素饲料的空白对照组,组 3 ~组 7 作为饲喂添加比例不同的沙棘粉饲料实验组,小鼠均单笼饲养 4 3 周。 饲喂剂量及配方每日投喂足量饲料和水, 各组饲料配方如表 1。表1 各组配方成分表(%) LDH 活力、 BLA 、 MG 、 LG 含量测试抗疲劳实验前, 从每组取小鼠 3只, 眼眶放血制血清送检, 测试乳酸脱氢酶( LDH ) 活力、肌糖原( MG ) 和肝糖原( LG ), LDH 活力, 参数 King 氏法测定[ 2]。 抗疲劳实验抗疲劳试验依陈奇方法[3], 将饲喂 4周的小组分别取 12 只按小鼠体重 10% 负重砝码,于水温 25~ 27℃、 40cm 深、直径为 20cm 的标本瓶中游泳, 进行抗疲劳试验。待其头部没入水下 5 秒时迅速捞起,记录游泳时间, 待其恢复 30min 后各取 6 只眼眶放血, 制备血清, 待送检测试 BLA , 各组剩余 6 只待其恢复 60min 后再眼眶放血, 制血浆送检测试 BLA 。 4 考虑到在对每一只鼠的每一次取血操作时, 对动物造成不同程度伤害性刺激,由此引起的抗疲劳强度无法保持一致, 故而设计成每一个实验测定都分批取样,进行一次性采血。 小鼠脑组织 MDA 、 GSH 含量取饲喂 4 周的小鼠,每组6只, 断颈处死, 迅速取出大脑, 用冰冷的 PBS 缓冲液制备 10% 脑匀浆, 离心后取上清液进行 MD A和 GS H 含量测定。测定步骤按试剂盒说明书进行, MDA 、 GSH 测定试剂盒由南京建成生物工程研究所提供。 2 结果 饲喂4 周后各组小鼠 LD H 活力、 MG 、LG与 BL A值见表2 。饲喂 4 周后各组小鼠血液指标初始值,各组取 6 只小鼠眼眶测试 MG 、 LG 、 BLA 和 LDH ,因这批动物取自抗疲劳动物之前,故称为初始数值,表 2 为测试结果。表2 各组小鼠 LDH 活力、 MG 、 LG 与 BLA 初始值(x± s) 5 注: 表中不同组的相同指标中,* 表示差异有显著性; **表示差异有非常显著性由表 2 统计分析结果可知, g3~ g5 沙棘粉组的小白鼠, 其 MG 和 LG 含量均显著大于空白组() ,其中维生素组也显著大于空白组() ; BLA 含量各组差异无显著性; g4~ g5 沙棘粉组和维生素组的 LDH 活力均显著大于空白组( ) , 说明 4% ~ 6% 沙棘粉在提高小鼠的 LDH 活力方面达到维生素对照组效果。 g6~ g7 组变化不显著,说明 8% ~ 10% 沙棘粉的效果