高效液相色谱法同时测定 珍菊降压滴丸中氢氯噻嗪和芦丁的含量.doc

1 高效液相色谱法同时测定珍菊降压滴丸中氢氯噻嗪和芦丁的含量【摘要】目的建立高效液相色谱法同时测定珍菊降压滴丸中氢氯噻嗪和芦丁的定量测定方法。方法以 Inertsil ODS-3 ( mm × 250 mm ,5μm )为固定相,以 % 冰醋酸(用三乙胺调 pH 至 )-乙腈( 80∶ 20 )为流动相,流速为 ml· min-1 ,检测波长为 270 nm 。结果氢氯噻嗪和芦丁的线性范围分别为 ~ μg· ml-1 ( r= 9)和 ~ μg· ml-1 (r= 9) ,平均回收率分别为 % , % 。结论该法快速、准确, 可同时测定珍菊降压滴丸中氢氯噻嗪和芦丁的含量。【关键词】珍菊降压滴丸氢氯噻嗪芦丁高效液相色谱法珍菊降压滴丸是新研制的新药,该药是珍菊降压处方中野菊花、珍珠层粉及芦丁 3 味中药( 或提取物) 和氢氯噻嗪与盐酸可乐定两味西药与辅料聚乙二醇经融化滴制而成的滴丸剂。本品为棕褐色或黑褐色滴丸, 气微香, 味苦[1]。本文 2 参照文献[2~3] 方法, 建立 HPLC 方法同时测定珍菊降压滴丸中氢氯噻嗪和芦丁的含量, 为该制剂的质量控制提供参考。 1 仪器与试药 仪器岛津 LC-20AT 高效液相色谱仪(在线脱气机、二元泵、自动进样器、 DAD 检测器, 岛津公司); LC-solution 色谱工作站; CP124S 电子分析天平( SARTORIUS , 德国); KQ-250DB 数控超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司)。 试药珍菊降压滴丸及阴性对照样品自制; 芦丁对照品(批号 100080-200306 , 供含量测定用), 氢氯噻嗪对照品(批号 10309-0001 ,供含量测定用) ,购自中国药品生物制品检定所;乙腈(色谱纯, Fisher 试剂公司,批号 052064 ); 其他试剂均为分析纯。 2 方法与结果 色谱条件的选择色谱柱为 Inertsil ODS-3 ( mm × 250 mm,5 μm) ,流动相: % 冰醋酸(用三乙胺调 pH 至 ) -乙腈( 80∶ 20), 检测波长 270 nm , 流速 ml/min , 柱温 3 为室温,进样量 20μl。 对照品溶液的配制精密称取氢氯噻嗪和芦丁对照品适量,分别加流动相制成每毫升含氢氯噻嗪 25μg 和每毫升含芦丁 100 μg 的对照品溶液。 供试品溶液的制备取本品 5 丸,精密称定,置 500 ml 量瓶中,加流动相至约 100 ml ,超声处理 10 min 使溶解,放冷, 加流动相至刻度, 摇匀, 滤过, 取续滤液作为供试品溶液。 阴性对照实验分别精密吸取两种对照品溶液 20μl,注入液相色谱仪。氢氯噻嗪的保留时间 Rt= min ,芦丁的保留时间 Rt= min 。取供试品溶液, 吸取 20μl, 注入液相色谱仪,记录色谱图。氢氯噻嗪的保留时间 Rt= min ,芦丁的保留时间 Rt= min 。取不含氢氯噻嗪和芦丁的阴性滴丸 5丸,按“ ”项下的供试品制备方法处理得缺氢氯噻嗪和芦丁的阴性对照品溶液